牛頓光學(xué)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀在用戶灝洋生物細(xì)胞建庫(kù)項(xiàng)目的應(yīng)用

快速、準(zhǔn)確計(jì)數(shù)——是我們對(duì)計(jì)數(shù)儀最基本也是最高的要求。

人類免疫細(xì)胞、IPS細(xì)胞建庫(kù)項(xiàng)目的開展

01項(xiàng)目簡(jiǎn)介

通過采集外周血，分離免疫細(xì)胞并儲(chǔ)存在符合零下196°C環(huán)境的專業(yè)細(xì)胞存儲(chǔ)庫(kù)中，利用超低溫技術(shù)長(zhǎng)久保存其活性。待將來身體需要時(shí)，提供健康保障?等。

天津?yàn)鬄槟峁┤祟惷庖呒?xì)胞庫(kù)建庫(kù)凍存的全部試劑、耗材以及技術(shù)指導(dǎo)服務(wù)：

02熒光細(xì)胞計(jì)數(shù)儀在項(xiàng)目中的優(yōu)異表現(xiàn)

本項(xiàng)目中涉及大量的細(xì)胞計(jì)數(shù)工作，且由于計(jì)數(shù)細(xì)胞為外周血來源的細(xì)胞，樣本中成分復(fù)雜，尤其是可能有紅細(xì)胞混雜，且紅細(xì)胞與PBMC大小相似，這就使得傳統(tǒng)計(jì)數(shù)方法不能滿足技術(shù)要求。

PBMC樣本與熒光染料混合后，單個(gè)核細(xì)胞細(xì)胞核被染色，紅細(xì)胞由于無核不能染色，因此完美適用于本項(xiàng)目計(jì)數(shù)工作。

本項(xiàng)目使用的細(xì)胞計(jì)數(shù)儀來自牛頓光學(xué)Jupita熒光細(xì)胞分析儀。以下為儀器界面，可以同時(shí)顯示多個(gè)樣本的計(jì)數(shù)結(jié)果，包含數(shù)量、活率、細(xì)胞平均直徑、結(jié)團(tuán)率等等。

以下為樣本在明場(chǎng)計(jì)數(shù)和熒光計(jì)數(shù)下的區(qū)別，可以看到明場(chǎng)下由于樣本有血小板和紅細(xì)胞等的混雜，視野很亂，計(jì)數(shù)不準(zhǔn)。在熒光下，清晰地顯示了有核細(xì)胞，計(jì)數(shù)準(zhǔn)確而清晰。

以下為熒光計(jì)數(shù)儀和流式細(xì)胞儀計(jì)數(shù)的對(duì)比數(shù)據(jù)，可發(fā)現(xiàn)，計(jì)數(shù)結(jié)果差異不大。（由于取樣、混勻、儀器等誤差不可能完全消除）

03IPS細(xì)胞建庫(kù)項(xiàng)目后續(xù)應(yīng)用

采集外周血后，制備IPS細(xì)胞。

IPS細(xì)胞質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：

1. 檢測(cè) hiPSCs 的多能性標(biāo)記 Oct4、Sox2、TRA-1-81、Nanog 干細(xì)胞標(biāo)志基因在大于 90%的細(xì)胞中穩(wěn)定表達(dá)。

2.核型檢測(cè)合格，排除異常染色體重組。

3. 提供短串聯(lián)重復(fù)序列 (short tandem repeat，STR)檢測(cè)報(bào)告，建立每個(gè)樣本的獨(dú)一無二的 DNA 身份證。

4. 提供檢測(cè)報(bào)告，無真菌、細(xì)菌以及支原體等微生物污染。

以上圖文轉(zhuǎn)載自“灝洋生物”

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