臺盼藍活率實驗
01簡介
在細胞生物學的探索旅程中,我們時常面臨一個關鍵問題:如何精確地衡量細胞的活力?這不僅關系到實驗數據的精確性,更直接影響到研究結論的可靠性。細胞計數儀,作為現代生物實驗室的得力助手,其活率分析功能的準確性自然成為了科研人員關注的焦點。
今天,我們就來聚焦一個核心議題——細胞計數儀在臺盼藍模式下的活率計數準確性。臺盼藍染色法,通過這種染色方法,我們可以觀察到活細胞的胞膜能夠排斥臺盼藍,保持原色;而死細胞由于胞膜的完整性受損,通透性增加,導致臺盼藍滲入細胞內部,將其染成藍色。因此能夠清晰地區分活細胞與死細胞。但是,當這項技術與現代細胞計數儀結合時,其結果是否能夠經得起科學的檢驗?
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臺盼藍染料
我們通過精心設計的臺盼藍活率實驗,對這一問題進行了深入探究。
02實驗目的
通過配置數個已知活率(理論活率)的HEK293細胞樣品,對其進行臺盼藍染色,并使用細胞計數儀測量活率,驗證細胞計數儀細胞活率分析的準確性。
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實驗示例圖
03實驗方案
1、將HEK293細胞復蘇后,使用PBS對細胞進行重懸,細胞狀態良好,在顯微鏡下觀察細胞,其活率約為99%;
2、水浴加熱滅活部分細胞,通過將活細胞與死細胞按比例混合,分別得到理論活率為90%的Cell1、70%的Cell2、45%的Cell3;
3. 使用牛頓光學Venus全自動高通量細胞計數儀對三種不同活率的樣品分別分析三次,取平均值。
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所用細胞計數儀
04結果展示
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左圖:臺盼藍計數結果 右圖:臺盼藍計數標記結果
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理論活率與儀器測量活率
05結論
牛頓光學細胞計數儀在高、中高、中活率的計數結果和理論值結果相近,牛頓光學細胞計數儀的臺盼藍活率計數結果準確。
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