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      《食品科學(xué)》:河南工業(yè)大學(xué)郭興鳳教授等:Ca2+對豌豆蛋白熱誘導(dǎo)和冷誘導(dǎo)凝膠特性及結(jié)構(gòu)的影響

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      豌豆分離蛋白(PPI)是一種非轉(zhuǎn)基因和低致敏性的植物蛋白,近年來受到廣泛關(guān)注。凝膠性是PPI的重要性質(zhì)之一,由于PPI含硫氨基酸含量少,其形成的凝膠中二硫鍵數(shù)量也較少,凝膠特性較弱。根據(jù)誘導(dǎo)方式的不同,PPI凝膠可分為熱誘導(dǎo)凝膠和冷誘導(dǎo)凝膠。研究表明,Ca2+既能增強(qiáng)熱誘導(dǎo)PPI凝膠特性,也能夠誘導(dǎo)PPI形成冷誘導(dǎo)凝膠。此外,Ca2+濃度會影響蛋白凝膠特性。

      河南工業(yè)大學(xué)糧油食品學(xué)院的萬昕冉、朱婷偉和郭興鳳*等人研究制備不同Ca2+濃度的熱誘導(dǎo)和冷誘導(dǎo)PPI凝膠,通過測定持水性、凝膠強(qiáng)度和流變學(xué)特性深入對比熱誘導(dǎo)凝膠和冷誘導(dǎo)凝膠的凝膠特性;通過測定分子間作用力、Zeta電位、表面疏水性、游離巰基、二硫鍵、二級結(jié)構(gòu)和微觀結(jié)構(gòu),系統(tǒng)分析造成熱誘導(dǎo)和冷誘導(dǎo)凝膠性質(zhì)差異的原因,并解析Ca2+對熱誘導(dǎo)和冷誘導(dǎo)PPI凝膠的影響機(jī)理。


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      Ca2+對PPI凝膠外觀形態(tài)的影響

      如圖2所示,不添加Ca2+的PPI凝膠塌軟。隨著體系中Ca2+濃度的增加,凝膠外觀形態(tài)逐漸變得平滑,結(jié)構(gòu)變得牢固。當(dāng)Ca2+濃度為15 mmol/L時,熱凝膠和冷凝膠都達(dá)到最佳形態(tài)。當(dāng)Ca2+濃度≥20 mmol/L時,熱凝膠和冷凝膠的高度開始降低,且熱凝膠出現(xiàn)水分析出的現(xiàn)象。結(jié)果表明,低濃度Ca2+可以改善PPI熱凝膠和冷凝膠特性,而高濃度Ca2+會使凝膠特性變差;熱凝膠的結(jié)構(gòu)較為牢固,冷凝膠沒有出現(xiàn)水分析出現(xiàn)象。


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      Ca2+對PPI凝膠強(qiáng)度及持水性的影響

      凝膠強(qiáng)度反映了凝膠網(wǎng)絡(luò)中分子間相互作用程度,是評價(jià)凝膠網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的重要指標(biāo)。圖3為熱凝膠和冷凝膠的凝膠強(qiáng)度及持水性。隨著體系中Ca2+濃度的增加,熱凝膠和冷凝膠的凝膠強(qiáng)度均呈現(xiàn)先增加后降低的趨勢,當(dāng)Ca2+濃度為15 mmol/L時凝膠強(qiáng)度均達(dá)到最大,分別為58.82 g和44.30 g。這表明低濃度的Ca2+(≤15 mmol/L)可增強(qiáng)PPI凝膠強(qiáng)度。Ca2+可以屏蔽蛋白質(zhì)側(cè)鏈上的負(fù)電荷,減弱分子鏈間的斥力,增強(qiáng)蛋白質(zhì)間相互作用,促進(jìn)蛋白聚集;另一方面,Ca2+可以與蛋白鏈上帶負(fù)電的基團(tuán)如羧基結(jié)合,在相鄰肽鏈間形成鈣橋,因此Ca2+能夠增強(qiáng)凝膠網(wǎng)絡(luò)的強(qiáng)度。當(dāng)Ca2+濃度>15 mmol/L時,熱凝膠和冷凝膠強(qiáng)度開始降低。高濃度Ca2+會破壞蛋白質(zhì)的水化作用,使得水分被排出,出現(xiàn)水與蛋白質(zhì)分離現(xiàn)象,蛋白溶解度降低,形成的凝膠網(wǎng)絡(luò)粗糙,導(dǎo)致凝膠強(qiáng)度降低。這與劉德陽等的研究結(jié)果相同。對比熱凝膠和冷凝膠發(fā)現(xiàn),在相同Ca2+濃度下熱凝膠的凝膠強(qiáng)度均大于冷凝膠,這表明熱凝膠網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)更牢固,從圖2也可以看出熱凝膠的高度大于冷凝膠。這可能是因?yàn)闊崮z中蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)之間的相互作用強(qiáng)于冷凝膠。

      凝膠持水性取決于凝膠網(wǎng)絡(luò)的致密程度及蛋白質(zhì)-水的相互作用。如圖3所示,隨著體系中Ca2+濃度增加,熱凝膠和冷凝膠的持水性呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢,當(dāng)Ca2+濃度為5 mmol/L時凝膠持水性達(dá)到最大,分別為97.71%和99.62%。這表明低濃度的Ca2+(≤5 mmol/L)能夠增強(qiáng)凝膠持水性。Ca2+可以與蛋白質(zhì)表面帶負(fù)電的親水基團(tuán)等結(jié)合形成鹽橋,促進(jìn)了蛋白的交聯(lián)聚集從而增加了凝膠網(wǎng)絡(luò)的致密程度,水分被物理截留在凝膠網(wǎng)絡(luò)中,因此持水性增加。但Ca2+濃度>5 mmol/L時凝膠的持水性開始下降。這是由于隨著Ca2+濃度的增加,Ca2+與PPI中親水基團(tuán)結(jié)合增加,削弱了親水基團(tuán)與水分子的相互作用,導(dǎo)致蛋白與水分離,形成的凝膠網(wǎng)絡(luò)粗糙不均勻,網(wǎng)絡(luò)空隙較大,因此熱凝膠和冷凝膠的持水性下降。對比熱凝膠和冷凝膠發(fā)現(xiàn),在相同Ca2+濃度下熱凝膠的持水性低于冷凝膠。熱凝膠在Ca2+濃度≥20 mmol/L時水分析出現(xiàn)象嚴(yán)重,而冷凝膠未出現(xiàn)水分析出現(xiàn)象(圖2),這也表明冷凝膠持水性較好。這可能是由于熱凝膠網(wǎng)絡(luò)孔隙大且蛋白質(zhì)與水的相互作用小于冷凝膠,導(dǎo)致熱凝膠的持水性較差。由于Ca2+濃度為25 mmol/L時凝膠結(jié)構(gòu)劣化較為嚴(yán)重,凝膠強(qiáng)度和持水性均低于未添加Ca2+凝膠,故后續(xù)不再對其進(jìn)行研究。


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      Ca2+對PPI凝膠動態(tài)流變學(xué)特性的影響

      對凝膠進(jìn)行頻率掃描得到的頻率變化曲線在一定程度上可以反映凝膠網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)強(qiáng)度的變化情況。如圖4所示,在相同頻率條件下,加入Ca2+后PPI熱凝膠和冷凝膠的儲能模量G’和損耗模量G”較未添加Ca2+的凝膠均大幅增加。但當(dāng)Ca2+濃度>15 mmol/L時,熱凝膠和冷凝膠的G’和G”開始下降。這表明低濃度的Ca2+(≤15 mmol/L)能夠增強(qiáng)PPI凝膠的黏彈性。G”與G’的比值為損耗角正切tanδ,tanδ越小表明體系固體特性越強(qiáng)。在測量的頻率范圍內(nèi),加入Ca2+后凝膠的tanδ均小于未添加Ca2+凝膠,表明Ca2+增強(qiáng)了PPI熱凝膠和冷凝膠的固體特性。這歸因于Ca2+與蛋白表面負(fù)電荷通過靜電相互作用形成鈣橋,促進(jìn)PPI交聯(lián)聚集,從而加強(qiáng)了PPI凝膠結(jié)構(gòu)強(qiáng)度。對比熱凝膠和冷凝膠發(fā)現(xiàn),在相同Ca2+濃度及相同頻率下,熱凝膠的tanδ小于冷凝膠。這表明熱凝膠的固體特性更強(qiáng),熱凝膠網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)強(qiáng)度更大。相同Ca2+濃度下熱凝膠的凝膠強(qiáng)度大于冷凝膠(圖3)。因此,低濃度的Ca2+(≤15 mmol/L)可增強(qiáng)PPI熱凝膠和冷凝膠的黏彈性及固體特性,熱凝膠的黏彈性和固體特性強(qiáng)于冷凝膠。








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      Ca2+對PPI凝膠分子間作用力的影響

      為了探究造成熱凝膠和冷凝膠的凝膠強(qiáng)度及持水性產(chǎn)生差異的原因,測定了熱凝膠和冷凝膠的分子間作用力,結(jié)果如圖5所示。隨著Ca2+濃度的增加,熱凝膠和冷凝膠中蛋白分子間的靜電相互作用呈現(xiàn)逐漸增加的趨勢。Ca2+可以與PPI表面帶負(fù)電的基團(tuán)通過靜電相互作用結(jié)合。因此隨著Ca2+濃度增加,靜電相互作用增加(圖5A)。熱凝膠和冷凝膠體系中氫鍵含量隨著Ca2+濃度增加呈現(xiàn)先增加后減少的趨勢,在Ca2+濃度為5 mmol/L 時達(dá)到最大,此時與未添加Ca2+凝膠相比分別增加了27.56%和38.25%(圖5B)。Ca2+可以與蛋白質(zhì)表面帶負(fù)電的親水基團(tuán)通過靜電相互作用結(jié)合,同時這些親水基團(tuán)之間也能通過氫鍵結(jié)合。因此隨著Ca2+濃度的增加,靜電相互作用增加,親水基團(tuán)之間的氫鍵作用被削弱,導(dǎo)致氫鍵含量下降。熱凝膠和冷凝膠體系中疏水相互作用和二硫鍵含量隨著Ca2+濃度的增加先增加后減少,在Ca2+濃度為15 mmol/L時達(dá)到最大(圖5C、D)。這是由于Ca2+通過形成鹽橋增強(qiáng)了PPI分子間的相互作用,導(dǎo)致蛋白質(zhì)分子會發(fā)生疏水聚集,因此疏水相互作用增加。且疏水相互作用的增加導(dǎo)致蛋白質(zhì)聚集程度增加,這促進(jìn)了更多游離巰基氧化形成二硫鍵,使得體系中二硫鍵含量隨著Ca2+濃度的增加而增加。但Ca2+濃度>15 mmol/L時體系中疏水相互作用和二硫鍵降低(圖5D),這是由于高濃度Ca2+使蛋白質(zhì)分子過度聚集,阻礙了疏水基團(tuán)和游離巰基的暴露,導(dǎo)致體系中疏水相互作用和二硫鍵含量減少。

      對比熱凝膠和冷凝膠中分子間相互作用力發(fā)現(xiàn),在相同Ca2+濃度下,熱凝膠體系中靜電相互作用、疏水相互作用和二硫鍵含量都大于冷凝膠。這表明熱凝膠中蛋白質(zhì)之間的相互作用強(qiáng)于冷凝膠,因此熱凝膠強(qiáng)度大于冷凝膠。在Ca2+存在的條件下對PPI進(jìn)行熱處理,能夠使Ca2+與PPI表面更多的負(fù)電荷結(jié)合,并且促進(jìn)了PPI中更多疏水基團(tuán)和游離巰基的暴露,這有利于疏水相互作用的形成及游離巰基轉(zhuǎn)化為二硫鍵。因此熱凝膠中的疏水相互作用和二硫鍵含量大于冷凝膠。綜上,熱凝膠的靜電相互作用、疏水相互作用和二硫鍵含量大于冷凝膠,因此熱凝膠中PPI之間的相互作用強(qiáng)于冷凝膠,熱凝膠的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)強(qiáng)度大于冷凝膠。






      5

      Ca2+對PPI Zeta電位的影響

      Zeta電位能夠表征體系中蛋白質(zhì)之間的排斥程度,可以反映蛋白質(zhì)分子的聚集狀態(tài),進(jìn)而調(diào)控凝膠網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的致密程度。如圖6所示,隨著Ca2+濃度的增加,PPI溶液的Zeta電位絕對值呈現(xiàn)降低趨勢,這表明PPI中表面負(fù)電荷減少。Ca2+的加入會與肽鏈上帶負(fù)電荷的氨基酸如羧基等通過靜電相互作用結(jié)合,因此隨著體系中Ca2+濃度的增加,負(fù)電荷減少,靜電斥力降低,PPI聚集程度增加。當(dāng)體系中Ca2+濃度達(dá)到20 mmol/L時,PPI的Zeta電位絕對值不再降低。Ca2+濃度增加的同時CaCl2中Cl-濃度也在增加,導(dǎo)致體系中的負(fù)電荷有所增加。Guo Ruqi等也同樣發(fā)現(xiàn)隨著CaCl2濃度的增加會導(dǎo)致Cl-的引入。不添加Ca2+的蛋白溶液中,經(jīng)過加熱的蛋白溶液Zeta電位絕對值小于未加熱蛋白溶液,這表明加熱后的蛋白溶液表面負(fù)電荷減少。其原因是蛋白加熱后結(jié)構(gòu)重排導(dǎo)致表面帶負(fù)電基團(tuán)逐漸被包埋,使得負(fù)電荷減少。在此基礎(chǔ)上,當(dāng)加入Ca2+后經(jīng)過加熱的蛋白溶液中能與Ca2+結(jié)合的負(fù)電基團(tuán)減少,因此形成的冷凝膠中靜電相互作用小于熱凝膠。在相同Ca2+濃度下,加熱蛋白溶液體系中的Zeta電位絕對值小于未加熱的蛋白溶液體系,表明加熱后的蛋白溶液體系穩(wěn)定性低,蛋白溶液的聚集程度大,因此形成的冷凝膠網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)致密,持水性較好,這與第2節(jié)結(jié)果相印證。


      6

      Ca2+對PPI凝膠中蛋白表面疏水性的影響

      H
      0 能夠反映蛋白質(zhì)疏水區(qū)域的暴露程度,從而反映出疏水相互作用的變化情況 。如圖 7 所示,隨著 Ca 2+ 濃度的增加,體系
      H
      0 呈現(xiàn)先降低后升高的趨勢,當(dāng) Ca 2+ 濃度為 15 mmol / L 時蛋白 H 0 最低。低濃度 Ca 2+ (≤ 1 5 mmol / L )降低了蛋白質(zhì)分子間的靜電斥力,促進(jìn)了蛋白質(zhì)聚集,疏水基團(tuán)包埋在聚集體內(nèi)部,從而降低了凝膠體系的
      H
      0 。高濃度 Ca 2+ (> 15 mmol / L )破壞了蛋白質(zhì)表面的水化層,導(dǎo)致蛋白質(zhì)的親水性降低, PPI 排斥水分子,從而增加了
      H
      0 。對比熱凝膠和冷凝膠的
      H
      0 發(fā)現(xiàn),熱凝膠的 H 0 小于冷凝膠,這是由于 Ca 2+ 存在的條件下對蛋白進(jìn)行熱處理促進(jìn)了疏水基團(tuán)的暴露,增強(qiáng)了疏水相互作用,使蛋白的聚集程度增加 ,導(dǎo)致熱凝膠內(nèi)部的疏水殘基被包埋,其
      H
      0 小于冷凝膠。


      7

      Ca2+對PPI凝膠中游離巰基及二硫鍵的影響

      游離巰基暴露在蛋白質(zhì)分子的表面,在凝膠形成過程中可以通過氧化作用形成二硫鍵,通過測定游離巰基及二硫鍵含量能夠反映蛋白構(gòu)象變化,結(jié)果如圖8所示。隨著Ca2+濃度的增加,熱凝膠和冷凝膠的游離巰基含量先減少后增加,二硫鍵含量先增加后減少,當(dāng)Ca2+濃度為15 mmol/L時,體系中游離巰基含量最低,二硫鍵含量最高。低濃度的Ca2+(≤15 mmol/L)中和了蛋白質(zhì)表面的負(fù)電荷,使蛋白質(zhì)之間的靜電斥力減小,蛋白質(zhì)聚集,部分游離巰基氧化形成二硫鍵,因此游離巰基含量減少,二硫鍵含量增加。Ca2+濃度過高(>15 mmol/L)時蛋白過度聚集,部分游離巰基被包埋,阻礙了二硫鍵的形成。這與Wang Yaru等的研究結(jié)果相同。對比熱凝膠和冷凝膠的游離巰基及二硫鍵含量發(fā)現(xiàn),熱凝膠體系中游離巰基含量少于冷凝膠,其二硫鍵含量大于冷凝膠。在Ca2+存在的條件下對PPI進(jìn)行熱處理能夠增加游離巰基的暴露程度,這有利于游離巰基轉(zhuǎn)化為二硫鍵,從而增加二硫鍵的含量,這導(dǎo)致熱凝膠的凝膠強(qiáng)度大于冷凝膠(圖3)。



      8

      Ca2+對PPI凝膠中蛋白二級結(jié)構(gòu)的影響

      傅里葉變換紅外光譜可以分析蛋白質(zhì)的構(gòu)象和官能團(tuán)的變化。選擇不添加Ca2+的PPI凝膠以及凝膠特性改善效果最佳的Ca2+濃度(15 mmol/L)制備PPI的熱凝膠和冷凝膠進(jìn)行分析,如圖9所示,1 600~1 700 cm-1由酰胺I帶(藍(lán)色框)中C—O拉伸振動產(chǎn)生,是蛋白質(zhì)的特征吸收帶。隨著Ca2+濃度增加,蛋白質(zhì)特征帶對應(yīng)的吸收峰沒有明顯的偏移,表明Ca2+與PPI不存在共價(jià)交聯(lián)。


      將酰胺I帶去卷積后分析得到蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)含量,結(jié)果如表1所示。PPI二級結(jié)構(gòu)中以

      - 折疊為主。與對照組相比,熱凝膠和冷凝膠中 PPI 的 β - 折疊相對含量顯著增加,分別從不添加 Ca 2+ 時的 31.77 % 增加至 41.74 % 和41.51 % , α - 螺旋及無規(guī)卷曲顯著降低。這表明 Ca 2+ 的加入使蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)發(fā)生了轉(zhuǎn)變。 Ca 2+ 的加入促進(jìn)了 PPI聚集,導(dǎo)致蛋白分子 β - 折疊結(jié)構(gòu)相對含量顯著增加 。β - 折疊屬于蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)中的有序結(jié)構(gòu),其含量增加有利于凝膠結(jié)構(gòu)的有序形成 。這說明相較于對照組,添加15 mmol / L Ca 2+ 熱凝膠和冷凝膠的結(jié)構(gòu)更加緊密有序。熱膠和冷凝膠中蛋白的二級結(jié)構(gòu)含量并沒有顯著差異。


      9

      Ca2+對PPI凝膠微觀結(jié)構(gòu)的影響

      為了進(jìn)一步直觀對比Ca2+對熱、冷凝膠結(jié)構(gòu)的影響,通過掃描電鏡觀察凝膠微觀結(jié)構(gòu)。如圖10所示,對照組的PPI凝膠表面粗糙不平,疏松多孔。與對照組相比,熱凝膠和冷凝膠網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)明顯,且較為有序。這是由于Ca2+的加入可以使蛋白形成鹽橋,促進(jìn)了蛋白的聚集,因此凝膠網(wǎng)絡(luò)中的孔隙減少,結(jié)構(gòu)變得有序和均勻。對比熱凝膠和冷凝膠的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn),熱凝膠的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)更加有序均勻,冷凝膠的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)致密。這是由于熱凝膠中分子間的靜電相互作用、疏水相互作用和二硫鍵含量較多,PPI之間的相互作用強(qiáng),形成的凝膠網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)有序均勻,因此熱凝膠的凝膠強(qiáng)度大。在冷凝膠形成過程中,PPI的帶負(fù)電荷基團(tuán)在加熱后被包埋,靜電斥力變小,PPI的聚集程度增大,導(dǎo)致形成的冷凝膠網(wǎng)絡(luò)致密,因此冷凝膠的持水性好。


      10

      熱凝膠和冷凝膠的形成機(jī)理

      如圖11所示,在熱凝膠的形成過程中,加入的Ca2+先與帶負(fù)電的蛋白質(zhì)側(cè)鏈基團(tuán)結(jié)合,降低了體系中的靜電斥力;且Ca2+與蛋白質(zhì)分子間形成鹽橋,促進(jìn)部分蛋白交聯(lián)。加熱處理后,蛋白變性使肽鏈展開,促進(jìn)了疏水相互作用以及游離巰基轉(zhuǎn)化為二硫鍵,在這些作用力下PPI聚集形成均勻有序的熱凝膠網(wǎng)絡(luò)。在冷凝膠的形成過程中,首先通過加熱使蛋白變性,肽鏈展開,疏水基團(tuán)及部分游離巰基暴露,在疏水相互作用和二硫鍵的作用下蛋白聚集。隨后Ca2+的加入中和了帶負(fù)電基團(tuán),減小靜電斥力,促使聚集體進(jìn)一步聚集形成致密的冷凝膠網(wǎng)絡(luò)。熱凝膠的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)均勻有序;冷凝膠的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)致密。這是由于先加入Ca2+后加熱蛋白有利于疏水基團(tuán)和游離巰基的暴露,因此更多的游離巰基轉(zhuǎn)換為二硫鍵,疏水相互作用增強(qiáng),因此熱凝膠網(wǎng)絡(luò)有序均勻。冷凝膠中先加熱蛋白使其形成聚集體,之后Ca2+交聯(lián)蛋白聚集體進(jìn)一步形成緊密的凝膠網(wǎng)絡(luò)。且冷凝膠中的氫鍵含量多,氫鍵作用距離較短,因此冷凝膠網(wǎng)絡(luò)致密。


      結(jié)論

      通過探究Ca2+濃度對熱凝膠和冷凝膠特性和結(jié)構(gòu)特性的影響發(fā)現(xiàn),低濃度的Ca2+(≤15 mmol/L)可通過增加體系中靜電相互作用、疏水相互作用和二硫鍵含量從而增強(qiáng)熱凝膠和冷凝膠網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)強(qiáng)度。高濃度Ca2+(>15 mmol/L)減小了體系中的分子間相互作用,從而降低熱凝膠和冷凝膠的凝膠特性。熱凝膠體系中靜電相互作用、疏水相互作用及二硫鍵含量多,其凝膠強(qiáng)度大;冷凝膠網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)致密,其凝膠持水性較好。本研究結(jié)果證實(shí),低濃度Ca2+(≤15 mmol/L)可增強(qiáng)PPI凝膠特性,其中Ca2+濃度為15 mmol/L改善PPI凝膠特性效果最佳;PPI熱凝膠和冷凝膠特性的差異是由于分子間作用力及凝膠網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的致密度不同所致。這一結(jié)果可為PPI凝膠特性的改善提供新思路和理論參考。

      本文《Ca2+對豌豆蛋白熱誘導(dǎo)和冷誘導(dǎo)凝膠特性及結(jié)構(gòu)的影響》來源于《食品科學(xué)》2025年46卷第16期72-80頁,作者:萬昕冉, 朱婷偉, 逯子?jì)? 楊月, 齊改改, 崔婉, 郭興鳳, 陳復(fù)生。DOI:10.7506/spkx1002-6630-20250117-133。點(diǎn)擊下方閱讀原文即可查看文章相關(guān)信息。

      實(shí)習(xí)編輯:魏雨諾;責(zé)任編輯:張睿梅。點(diǎn)擊下方閱讀原文即可查看全文。圖片來源于文章原文及攝圖網(wǎng)

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      楊興文
      2025-12-22 20:58:12
      亂!U16國足隊(duì)長前女友成韓國少年國腳女友 曾爆料盧琦政出軌裸聊

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      念洲
      2025-12-22 13:44:57
      柴智屏評價(jià)F4變F3:朱孝天性格20年沒變!青禾扮演者被拉黑很無奈

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      一盅情懷
      2025-12-20 17:52:25
      福原愛懷孕巨肚現(xiàn)形!首揭「2020年就想離婚」友人心疼:她很努力

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      ETtoday星光云
      2025-12-22 14:18:05
      又一個大V被封!任何政治狂熱,都是國家和人民的災(zāi)難!

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      深度報(bào)
      2025-12-10 22:37:02
      全紅嬋被嘲沒文化?看完她的毛筆字,不知打了多少人的臉

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      一盅情懷
      2025-12-22 16:01:37
      冬至了,地球比夏至距離太陽更近500萬公里,為何反而更冷?

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      火星一號
      2025-12-20 22:53:16
      有情有義!郭艾倫心痛郭士強(qiáng):頭發(fā)更白,壓力更大,看著很心疼

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      體育哲人
      2025-12-21 15:46:39
      一頓飯近千元, 一扎西瓜汁賣168, 全聚德是怎么把顧客吃跑的?

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      阿器談史
      2025-12-17 19:45:09
      胡兵薛佳凝罕見同框!47歲薛佳凝老的很快,和54歲胡兵合影像姐弟

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      小徐講八卦
      2025-12-22 13:38:45
      3連敗!3.9億豪陣要散了!商討3方交易逆轉(zhuǎn)乾坤,追冠軍后衛(wèi)沖冠

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      毒舌NBA
      2025-12-22 20:05:24
      肝臟偏愛這杯水!清肝養(yǎng)肝又護(hù)肝,喝著喝著脾胃也慢慢好起來

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      江江食研社
      2025-12-21 20:30:04
      給的確實(shí)太多了!中亞五國被曝光已與日本達(dá)成“拋棄”中俄的協(xié)議

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      愛看劇的阿峰
      2025-12-22 12:38:17
      婚變傳聞后,羅晉攜任素汐與母親去祈福,撕碎了唐嫣最后一絲體面

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      姩姩有娛
      2025-12-22 18:32:13
      柬埔寨指責(zé)泰國無視中美調(diào)停,繼續(xù)發(fā)動進(jìn)攻和侵略

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      環(huán)球熱點(diǎn)快評
      2025-12-21 09:59:35
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      環(huán)球網(wǎng)資訊
      2025-12-22 10:03:18
      2025-12-22 21:56:49
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