大和米蕈調節老年人群NK細胞活性：一項隨機、雙盲、安慰對照研究

全球老年人口正快速增長。世界衛生組織預測，到2050年，65歲及以上人口將增至15億，屆時將顯著超過5歲及以下兒童的人口數量。由于這一群體感染、癌癥和退行性疾病發病率較高，相關醫療資源投入尤為顯著。

老年群體的免疫缺陷是導致其感染、癌癥和神經退行性疾病易感性增加的重要原因。最新研究發現，神經系統與免疫系統存在密切關聯，二者通過重要信號交流維持穩態平衡。此前被認為僅存在于免疫系統的多種蛋白質，現已在健康神經系統中被檢測到。

近些年提出的“突觸免疫學”概念，專門用于描述免疫調節因子與突觸功能之間的相互作用。多項研究證實，免疫功能衰退與感染及癌癥風險增加存在關聯，這些研究顯示白細胞的質功能會隨年齡增長而下降。

在老年群體的免疫缺陷研究中，自然殺傷（NK）細胞的年齡依賴性減少尤為值得關注——這類細胞本是抵御惡性腫瘤和病毒感染細胞的首道防線。因此，增強 NK 細胞活性已成為老年群體治療的關鍵靶點。

鑒于上述情況，我們需要尋找天然、安全且經濟的制劑來改善與年齡相關的健康狀況和疾病管理。在本項初步研究中，科研人員假設源自米糠的天然膳食補充劑——大和米蕈（MGN-3/Biobran），能夠對抗56歲以上老年群體因年齡增長導致的 NK 細胞活性下降。

大和米蕈（MGN-3/Biobran）通過使用香菇酶提取物水解米糠制成，多項研究已證實其強大的免疫調節作用。例如，在20-46歲年輕成人受試者中，大和米蕈（MGN-3/Biobran）可使 NK 細胞活性提升2-3倍。該效應具有劑量和時間依賴性，并與 NK 細胞對腫瘤細胞靶標的結合能力增強相關。此外，體內研究還證實了大和米蕈（MGN-3/Biobran）對人類T細胞和B細胞有絲分裂原反應的積極影響。

為驗證研究假設，科研人員在埃及沙爾基亞省扎加齊格市的扎加齊格大學醫院開展了一項為期一個月的隨機雙盲安慰劑對照臨床試驗，受試者均為老年患者，旨在評估老年患者對大和米蕈（MGN-3/Biobran）免疫調節作用的反應，并驗證先前報道的大和米蕈（MGN-3/Biobran）對 NK 細胞活性的積極影響是否適用于該人群。

打開百度APP暢享高清圖片

研究對象和方法

1、大和米蕈（MGN-3/Biobran）

大和米蕈（MGN-3/Biobran）是一種通過將米糠半纖維素與香菇多糖水解酶反應制得的變性半纖維素。該物質屬于阿拉伯木聚糖類，主鏈為木糖，側鏈為阿拉伯糖聚合物。

實驗中，受試者每日服用500毫克大和米蕈（MGN-3/Biobran）粉末，該粉末封裝于獨立小袋中。對照組則服用等量安慰劑粉末，兩者在顏色、氣味和質地方面完全無法區分。

除小袋底部印有字母編碼外，大和米蕈（MGN-3/Biobran）與安慰劑的包裝袋外觀完全一致。大和米蕈（MGN-3/Biobran）和安慰劑藥包由日本東京大和制藥株式會社提供。

研究材料成分說明：大和米蕈（MGN-3/Biobran）組袋裝制劑包含Biobran/ MGN -3（500毫克）、麥芽糖醇（1000毫克）、糊精（200毫克）、羥丙基二淀粉磷酸酯（280毫克）及磷酸三鈣（20毫克）。安慰劑組袋裝制劑則含有麥芽糖醇（1000毫克）、糊精（200毫克）、羥丙基二淀粉磷酸酯（780毫克）和磷酸三鈣（20毫克）。

2、患者入選/排除標準

入選標準。本研究納入56歲或以上的受試者，這些受試者愿意提供書面同意書，自愿參與研究。

納入標準。包括：排除當前或有感染史、惡性腫瘤、自身免疫性疾病、顯著門脈高壓及全血細胞減少癥，或存在嚴重心理創傷的受試者。同時排除正在使用服用維生素或抗生素補充劑、正在哺乳期的女性，以及正在接受其他抗病毒或抗癌治療（如放療、化療）的患者。

3、研究受試者和設計

從埃及扎加齊格大學醫院門診部的訪客中隨機選取了12名表觀健康的老年人（≥56歲，6名男性和6名女性）。使用 SPSS 的隨機抽樣選擇功能，將受試者隨機分配至大和米蕈（MGN-3/Biobran）組（n=6，口服500mg/day）或安慰劑對照組（n=6，口服500 mg/day）。

僅首席研究員（PI）知曉大和米蕈（MGN-3/Biobran）和安慰劑組的代碼。每位參與者在研究開始和結束時各提供2份血液樣本（每份4毫升），用于實驗室和流式細胞術檢測。

研究期間，要求入組受試者未經首席研究員咨詢不得服用任何非處方藥（包括維生素）。所有參與者均需向首席研究員報告任何異常癥狀或體征的出現。

4、實驗室調查

檢測項目包括紅細胞（RBC）、血細胞比容（HCT）、血紅蛋白（Hb）、平均紅細胞血紅蛋白（MCH）、平均紅細胞體積（MCV）、血小板計數、白細胞（WBC）、中性粒細胞以及嗜堿性粒細胞與嗜酸性粒細胞。

肝腎功能實驗室檢查項目包含丙氨酸氨基轉移酶（血清谷氨酸丙酮酸轉氨酶，ALT/ SGPT）、天冬氨酸氨基轉移酶（血清谷氨酸草酰乙酸轉氨酶，AST/SGOT） 及 尿 酸 （UA）。

ALT、AST、 堿 性 磷 酸 酶（ALP）和UA水平均采用光度法檢測，使用瑞士羅氏公司（巴塞爾）生產的 COBAS Integra 400 plus全自動生化分析儀完成檢測。

5、脫顆粒試驗

將血液以100 μl 的體積分裝到4個試管中，分別作為刺激組、未刺激對照組、陽性對照組或IgG同型陰性對照。

通過化學刺激法對 NK / NKT 細胞進行處理：將細胞與佛波醇-12-肉豆蔻酸-13-乙酸酯（PMA，50ng/ml；Sigma-Aldrich；Merck KGaA）和Ca2?離子載體（離子霉素，250 ng/ml，Sigma）的混合液共同孵育（5小時，37°C，5%（體積比）二氧化碳），最終體積為500 μl（用 RPMI -1640培養基調整）。

未刺激樣本在不含PMA/離子霉素的 RPMI -1640培養基中孵育，而陽性對照樣本則同時添加了細胞松弛素與PMA/離子霉素。在PMA/離子霉素刺激過程中，加入經 FITC 標記的小鼠抗人CD-107a克隆H4A3抗體。

孵育1小時后，加入莫能菌素至終濃度6 μg /ml，以阻斷CD107a的內化和降解。在IgG同型陰性對照管中，用小鼠抗人 FITC 標記的IgG抗體替代CD107a進行對照。

孵育完成后，使用BD PharmLyse（BD Bioscience）裂解紅細胞，隨后通過離心收集細胞，用染色緩沖液洗滌一次，并在100 μl 染色液中重新懸浮。

細胞樣本經緩沖液處理后，加入5 μl PE標記的小鼠抗人CD56抗體克隆R19-760（NCAM -1，BD Bioscience）和5μl PerCP標記的小鼠抗人CD3抗體克隆SK7（BD Bioscience），于37℃孵育15分鐘進行染色。

隨后通過離心收集細胞，用FACS緩沖液洗滌一次后，重新懸浮于FACS緩沖液中。最終使用BD FACSCalibur流式細胞儀配合CellQuest軟件（BD Bioscience）完成分析。

6、樣本量計算

使用G*Power軟件包進行重復測量方差分析時，假設效應量為0.80，采用兩組數據進行雙因素分析。當顯著性水平（α）設定為0.05時，每組6名受試者（共12名）的樣本量可確保統計學顯著性結果的檢驗效能達到0.82。

7、統計學分析

連續變量表示為均值±標準差。為比較組間差異，采用雙尾學生t檢驗或Fisher精確檢驗；而為評估組內治療效果（即比較治療后與治療前水平），則使用雙尾配對t檢驗。

通過Shapiro-Wilks檢驗判斷數據是否符合正態分布。對于非正態分布數據，分別采用非參數檢驗（Wilcoxon符號秩檢驗）和Mann-Whitney檢驗來分析組內及組間治療效果。P<0.05視為具有統計學顯著性差異。圖表繪制時采用均值±95%置信區間。

結果

1、血液學與生化指標分析

研究對比了大和米蕈（MGN-3/Biobran）組與安慰劑組12名老年受試者的基線血液參數、肝酶及腎功能指標。表I和表II數據顯示，除AST水平（P=0.041）外，兩組在所有基線指標上均無統計學顯著差異（P>0.05）。

表I進一步顯示，除血紅蛋白（Hb）、總膽紅素（MCV）、堿性磷酸酶（MCH）和天冬氨酸氨基轉移酶（AST）水平外，大和米蕈（MGN-3/Biobran）組在補充1個月后的各項指標均未出現顯著變化（P<0.05）。

表II表明，安慰劑組在補充1個月后的各項指標也未出現顯著差異，但Hb和MCH 水平除外（P<0.05）。這一結論得到了大和米蕈（MGN-3/Biobran）組未出現任何副作用的佐證，表明該治療方案在所用劑量和療程下安全可靠。

值得注意的是，大和米蕈（MGN-3/Biobran）組在治療1個月后觀察到顯著的改善效果，而安慰劑組的改善幅度相對較小。具體表現為Hb、 MCV 和MCH 水平較治療前均有提升。

此外，大和米蕈（MGN-3/Biobran）顯著降低了天冬氨酸氨基轉移酶（AST，即天冬氨酸轉氨酶，單位：國際單位）水平，提示其具有改善肝功能的作用。

表I：大和米蕈（MGN-3/Biobran）組老年受試者的血液學和生化特征（血液參數、肝酶和腎功能）。

表II：安慰劑組老年受試者的血液學和生化特征（血液參數、肝酶和腎功能）。

2、淋巴細胞、 NK 和 NKT 細胞百分比

表III數據表明，淋巴細胞、 NK 和 NKT 細胞百分比的基線值（治療前）無顯著差異，大和米蕈（MGN-3/Biobran）組與安慰劑組相比無顯著差異（P>0.05）。

表III數據顯示，與基線值相比，大和米蕈（MGN-3/Biobran）和安慰劑補充劑在1個月后對淋巴細胞、 NK 細胞和NKT 細胞比例均未產生顯著影響（P>0.05）。觀察到的淋巴細胞比例增幅符合成人及老年群體的正常范圍（18-44%）。

表III：大和米蕈（MGN-3/Biobran）與安慰劑補充劑對各組淋巴細胞、 NK 細胞及 NKT 細胞百分比的治療前后變化效果。

3、表達CD107a的 NK 細胞

通過流式細胞術分析，科研人員研究了大和米蕈（MGN-3/Biobran）對PMA/離子霉素激活的 NK 細胞CD107a脫顆粒的影響。補充大和米蕈（MGN-3/Biobran）顯著上調了PMA/離子霉素刺激下表達CD107a的 NK 細胞數量（圖1和表IV）。

兩組在治療前PMA/離子霉素刺激的 NK 細胞中CD107a表達水平變化趨勢相似。需要特別說明的是，大和米蕈（MGN-3/Biobran）組（60.5%）與安慰劑組（40.9%）PMA/離子霉素激活 NK 細胞中CD107a表達率的對比（表IV），經Mann-Whitney U檢驗顯示無統計學差異（具體檢驗結果未展示）。

圖1：大和米蕈（MGN-3/Biobran）對PMA/離子霉素化學激活的 NK 細胞中CD107a表達比例的影響。連續1個月補充大和米蕈（MGN-3/Biobran）后，經PMA/離子霉素處理的CD107a陽性 NK 細胞比例顯著增加。柱狀圖顯示中位數±標準誤（IQR）。采用Wilcoxon符號秩檢驗和Mann-Whitney U檢驗分別比較組內（治療前后）和組間【大和米蕈（MGN-3/Biobran）組與安慰劑組】差異。兩組治療前水平未見顯著差異。與PMA/離子霉素刺激的 NK 細胞相比，在補充治療前顯著更高（P<0.05）。 與PMA/離子霉素刺激的 NK 細胞相比，在安慰劑治療組中顯著更高（P<0.05）。

表IV：各組激活 NK 細胞與 NKT 細胞中CD107a表達水平的治療前后對比。

此外，圖2展示了大和米蕈（MGN-3/Biobran）對上調CD107a陽性 NK 細胞比例的促進作用。經PMA/離子霉素刺激后，表達CD107a的 NK 細胞數量顯著高于基線水平。相比之下，安慰劑組補充劑未能提升PMA/離子霉素刺激后表達CD107a的 NK 細胞比例。在安慰劑組受試者中，僅極少數 NK 細胞呈現CD107a陽性（圖2）。

數據表明，大和米蕈（MGN-3/Biobran）可誘導 NK 細胞表達CD107a，而該蛋白表達水平的提升已被證實與 NK 細胞細胞毒性效應的增強存在正相關。

圖2：流式細胞術分析對比(A)安慰劑與(B)大和米蕈（MGN-3/Biobran）對PMA/離子霉素刺激的 NK 細胞及未刺激 NK 細胞中CD107a表達的影響。與未補充大和米蕈（MGN-3/Biobran）的PMA/離子霉素刺激前 NK 細胞（中下）和1個月安慰劑治療后的PMA/離子霉素刺激 NK 細胞（右上）相比，補充大和米蕈（MGN-3/Biobran）一個月后，PMA/離子霉素刺激的 NK 細胞中CD107a陽性細胞數量顯著增加（右下）。在治療前，PMA/離子霉素刺激組與未刺激組的 NK細胞CD107a表達水平在安慰劑組和大和米蕈（MGN-3/Biobran）組中均無顯著差異（中組和左組）。

4、表 達 CD107a的 NKT 細 胞

與 基 線 值 相 比 ，大和米蕈（MGN-3/Biobran）和安慰劑補充劑均未顯著上調PMA/伊諾霉素刺激的 NKT（CD3陽性、CD56陽性）細胞表達CD107a的百分比（圖3和表IV）。

圖3：大和米蕈（MGN-3/Biobran）對PMA/離子霉素化學刺激后CD107a陽性 NKT 細胞百分比的影響。與基礎水平或安慰劑組相比，大和米蕈（MGN-3/Biobran）對PMA/離子霉素化學激活的CD107a陽性 NKT 細胞百分比未產生顯著統計學變化。柱狀圖表示中位數±標準誤（IQR）。采用Wilcoxon符號秩檢驗和Mann-Whitney檢驗分別比較組內（前后）和組間【大和米蕈（MGN-3/Biobran）與安慰劑】差異。

大和米蕈（MGN-3/Biobran）是一種源自米糠的阿拉伯木聚糖，其主鏈為木糖，側鏈為阿拉伯糖聚合物。它是一種強效的生物反應調節劑（BRM），其作用機制體現在體外實驗中能顯著增強外周血淋巴細胞的NK 細胞活性及IFN -生成能力，并在年輕成人和癌癥患者中提升 NK 細胞活性。

該制劑對動物實驗也表現出類似效果，包括老年小鼠和腫瘤動物模型。這種活性增強與 NK細胞顆粒含量增加及其對腫瘤細胞靶點的結合能力提升密切相關。為明確該生物反應調節劑對老年群體的益處，仍需針對老年受試者開展更多關于 NK 功能的研究。

NK 細胞作為抵御癌癥和病毒感染的第一道防線，其細胞毒性作用能直接殺滅目標細胞。然而研究發現，隨著年齡增長，NK 細胞功能會逐漸衰退，這不僅影響實驗動物，也出現在人類群體中，使得老年群體更容易感染病毒和罹患惡性腫瘤。

隨著年齡增長，NK 細胞活性下降與單細胞溶細胞活性降低及顆粒穿孔素表達減少有關，而顆粒穿孔素是破壞癌細胞和病毒感染細胞的主要成分，這一特征同時存在于 NK 細胞和細胞毒性T淋巴細胞中。

本研究的初步數據顯示，每日攝入大和米蕈（MGN-3/Biobran）以500 mg/day的劑量補充1個月可增加老年群體的 NK 細胞活性。其潛在機制尚不清楚，但可能歸因于 NK 顆粒穿孔素和顆粒酶B的增加，或由于大和米蕈（MGN-3/Biobran）能夠影響早期信號事件，從而觸發蛋白激酶C。

兩組老年受試者【大和米蕈（MGN-3/Biobran）組與安慰劑組】在治療后一個月時，非PMA/離子霉素刺激的 NK 細胞CD107a表達水平較基線值變化均無統計學意義。然而，大和米蕈（MGN-3/Biobran）顯著提升了PMA/離子霉素刺激后表達CD107a的 NK 細胞比例，較基線值和安慰劑組均呈顯著性差異（圖1）。

流式細胞術檢測結果（圖2B）進一步證實了大和米蕈（MGN-3/Biobran）對表達CD107a的 NK 細胞的上調作用。安慰劑組受試者未出現PMA/離子霉素誘導的 NK 細胞表達CD107a上調現象，僅極少數 NK 細胞呈陽性（圖2A）。

值得注意的是，大和米蕈（MGN-3/Biobran）輔助后活性的提升與 NK 細胞比例無相關性。表III數據顯示，大和米蕈（MGN-3/Biobran）組與安慰劑組的淋巴細胞百分比和NK 細胞百分比均未出現顯著變化。這些數據與他人研究結果一致，健康受試者的淋巴細胞正常范圍為18%-44%， NK 細胞正常范圍為7%-28%。研究顯示，NK 細胞表達CD107a與細胞毒性效應增強呈正相關。

最新研究顯示，CD107a不僅是脫顆粒的標志物，更在溶酶體形成及脫顆粒過程中發揮關鍵作用。當通過RNA干擾技術抑制 NK 細胞中CD107a的表達時，細胞無法完成脫顆粒過程。研究發現，顆粒酶B可靶向細胞，導致穿孔素運輸受阻、溶酶體顆粒中的穿孔素含量降低，以及 NK 細胞的細胞毒性活性受損。

另一方面，CD107a表達量的增加與 NK 細胞的細胞因子分泌及細胞毒性活性增強呈正相關。因此，研究結果表明，大和米蕈（MGN-3/Biobran）能增強 NK 細胞的溶酶體顆粒運輸能力、脫顆粒活性及細胞毒性。

NK 細胞被認為是先天免疫應答與適應性免疫系統之間的橋梁，其激活將導致其他免疫細胞亞群的調節。這一結論在早期的研究中得到了證實，這些研究顯示大和米蕈（MGN-3/Biobran）在攝入后能夠調節人CD8 T細胞、CD4T細胞和B細胞。

自然殺傷T細胞（NKT 細胞）是一類具有雙重特征的調節性淋巴細胞，其表面同時表達T淋巴細胞（如CD3、α/β T細胞受體）和 NK 細胞（如CD56、NK1.1）的典型受體。目前尚不完全清楚大和米蕈（MGN-3/Biobran）為何能誘導PMA/離子霉素刺激的表達CD107a的 NK 細胞，卻無法在老年受試者中誘導 NKT 細胞的激活，這可能與 NK 細胞和 NKT 細胞的受體差異有關。

早期研究發現，在體外經大和米蕈（MGN-3/Biobran）補充16小時后，可顯著上調 NK 細胞表面三種關鍵受體：早期激活抗原CD69、 白 細 胞 介 素 -2 受 體 CD25， 以 及 黏 附 分 子 CD54（ICAM-I）。

NKT 細胞是一類由抗原呈遞細胞表面的CD1d（分化簇1d）分子結合脂質抗原激活的T細胞群體。目前已鑒定出五種不同的CD1基因（CD1a-e）。其中CD1a-c蛋白可被多種常規αβ T細胞識別，而CD1d蛋白則特異性激活αβ T細胞的特定亞群。脂質抗原的細胞內代謝途徑在構建功能性 NKT 細胞庫中起著關鍵作用。科研人員認為，需要對這些細胞的脂質特性進行更深入的研究，旨在評估受試者對大和米蕈（MGN-3/Biobran）免疫調節作用的反應。

研究結果表明，大和米蕈（MGN-3/Biobran）能激活老年受試者的 NK 細胞活性。美國國家老齡化研究所與阿爾茨海默病協會的指南指出，飲食與大腦結構及功能變化存在直接關聯。越來越多的實驗證據表明，突觸可能是阿爾茨海默病、帕金森病和多發性硬化癥等疾病異常的根源所在。事實上，長期增強（LTP）和長期抑制（LTD）在誘導、維持或逆轉過程中出現的異常現象，是這類研究中常見的現象。

不同腦部疾病模型以及與炎癥相關的人類病理均表明，不同病癥的病因機制是免疫介質異常表達與其他疾病特異性特征共同作用的結果。值得注意的是，膳食補充劑L-色氨酸能有效抑制年齡增長導致的海馬體血清素（5-HT）生成下降，從而延緩認知衰退；而西地那非（一種磷酸二酯酶-5抑制劑）治療則改善了阿爾茨海默病小鼠模型中海馬體突觸功能障礙和記憶缺陷。本研究及其他相關成果，或將為設計免疫神經靶向療法提供新思路。

特別值得注意的是，大和米蕈（MGN-3/Biobran）在老年受試者中實現的 NK 免疫調節效應是在500 mg/day的低劑量下實現的。參與這項隨機雙盲臨床試驗的高齡受試者均身體健康，無任何疾病史，且未服用其他免疫調節藥物，這表明健康高齡受試者對大和米蕈（MGN-3/Biobran）的 NK 免疫調節作用表現出顯著反應。

本研究數據顯示，大和米蕈（MGN-3/Biobran）具有安全性，治療過程中未引發任何研究參數的顯著毒性變化。值得注意的是，大和米蕈（MGN-3/Biobran）組在治療1個月后觀察到某些有益效果，安慰劑組則效果較弱。這些改善包括血紅蛋白（Hb）、總膽紅素（MCH）和堿性磷酸酶（ALP）水平的提升。

此外，大和米蕈（MGN-3/Biobran）顯著降低了天冬氨酸轉氨酶（AST，即谷草轉氨酶，簡稱 SGOT）水平，提示肝功能得到改善。這一發現與近期研究結果一致——在丙型肝炎患者中，大和米蕈（MGN-3/Biobran）使用后病毒血癥水平顯著降低，證實了該制劑改善肝功能的能力。

多項毒性研究表明，大和米蕈（MGN-3/Biobran）具有安全無毒的特性：i) 在比格犬亞慢性毒性試驗、豚鼠抗原性研究及致突變性測試中均表現良好；ii) 其半數致死量（LD50）超過36克/千克；iii) 阿姆斯致突變性試驗結果為陰性。此外，針對接受化療的癌癥患者開展的研究顯示，該藥物顯著改善了患者的食欲及生活質量（QOL）各項指標。

本研究的安慰劑組攝入了膳食纖維羥丙基二淀粉磷酸酯（HDP），該物質目前被用作食品添加劑。表II和表III的數據表明，攝入HDP的受試者相較于基線值，其血紅蛋白（Hb）和總抗氧化能力（MCH）水平均顯著提升。

本研究的一個局限在于樣本量較小，需要更大規模的研究來驗證結論。另一個局限是，難以全面檢測所有分子標記物，這些標記物對于識別大和米蕈（MGN-3/Biobran）誘導的 NK 細胞激活（而非 NKT 細胞）的潛在機制至關重要。

綜上所述，本研究的初步結果有力表明，大和米蕈（MGN-3/Biobran）能夠有效對抗老年群體的NK 細胞免疫衰老，這表明該制劑在降低癌癥和病毒感染發生率方面具有潛力。

結論

本研究首次將大和米蕈（MGN-3/Biobran）的生物反應調節劑（BRM）效應拓展至老年人群，具體表現為增強 NK 細胞脫顆粒功能和細胞毒性活性。

大和米蕈（MGN-3/Biobran）是一種無毒且價格親民的膳食補充劑，有望為健康與患病的老年人群提供降低醫療開支的有效途徑。我們未來的研究方向包括開展多中心前瞻性臨床試驗，評估該補充劑在老年群體中預防感染和腫瘤發生的作用。

免責聲明：大和米蕈LENTIN Plus 1000LY作為一款免疫調節劑，屬于保健食品，不能代替藥物治療疾病，大家應理性對待。#老年人群 #免疫調節 #大和米蕈 #阿拉伯木聚糖