浙中醫(yī)大附屬寧波市中醫(yī)院團(tuán)隊(duì)揭示溫陽消癥湯通過JAK2/STAT3信號調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞極化減輕腎纖維化

【寫在前面】：本期推薦的是由浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬寧波市中醫(yī)院寧波中醫(yī)藥研究院、浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬寧波市中醫(yī)醫(yī)院腎內(nèi)科、上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬曙光醫(yī)院等研究團(tuán)隊(duì)合作近期發(fā)表于Journal of Ethnopharmacology(IF5.4）的一篇文章，揭示溫陽消癥湯通過JAK2/STAT3信號通路調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞極化減輕腎纖維化。

【期刊簡介】

【題目及作者信息】

Wenyang Xiaozheng decoction modulates macrophage polarization via JAK2/STAT3 signaling pathway to reduce renal fibrosis

民族藥理學(xué)相關(guān)性

溫陽消癥湯（WYXZ）是一種基于“溫陽化瘀”原理的中藥方劑，臨床上已證實(shí)能改善慢性腎臟?。–KD）患者的腎功能。然而，其治療作用的確切機(jī)制仍有待闡明。

研究的目的

探討WYXZ是否通過JAK2/STAT3信號通路調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞極化，從而減輕腎纖維化。

材料和方法

C57BL/6J小鼠經(jīng)5/6腎切除、WYXZ（4.94或9.88 g/kg）或纈沙坦治療8周后出現(xiàn)腎纖維化。檢測腎功能（血肌酐/尿素氮）、組織病理學(xué)（HE/Masson染色）和巨噬細(xì)胞極化（CD86+/CD206+流式細(xì)胞術(shù)）。體外培養(yǎng)RAW264.7巨噬細(xì)胞，用WYXZ藥物血清（2.5～7.5%）±JAK2激動劑丁酰胺或STAT3 shRNA處理后，觀察炎癥反應(yīng)（ELISA檢測IL-6/IL-10分泌）、極化狀態(tài)（流式細(xì)胞術(shù)檢測）和JAK2/STAT3通路活化（Western blot檢測磷酸化JAK2/STAT3）。在RAW264.7/HK-2共培養(yǎng)物中評估纖維化標(biāo)記物（α-平滑肌肌動蛋白、α-SMA/Ⅰ型膠原、Col-I）。

結(jié)果

WYXZ能顯著減輕5/6腎切除小鼠的腎纖維化，改善腎功能，同時抑制M1巨噬細(xì)胞極化，增強(qiáng)M2極化。在體外，WYXZ含藥血清可減少LPS刺激的巨噬細(xì)胞分泌炎性細(xì)胞因子并抑制JAK2/STAT3通路的激活。這些作用被JAK2興奮和丁酰胺逆轉(zhuǎn)，并通過STAT3基因敲除而消除。關(guān)鍵的是，在巨噬細(xì)胞-腎小管細(xì)胞共培養(yǎng)中，WYXZ通過抑制巨噬細(xì)胞JAK2/STAT3信號通路減少纖維化標(biāo)志物的表達(dá)。

結(jié)論

WYXZ通過抑制JAK2/STAT3，重新編程巨噬細(xì)胞極化，從而減輕腎纖維化，驗(yàn)證其對CKD的傳統(tǒng)用途。

圖文摘要

【前言】

慢性腎臟病（CKD）是一種不可逆的進(jìn)展性疾病，可導(dǎo)致腎功能不全和結(jié)構(gòu)損害。CKD是一個重大的公共衛(wèi)生問題，因?yàn)樗谌虻陌l(fā)病率超過8億，發(fā)病率、死亡率和相關(guān)的醫(yī)療費(fèi)用都很高。腎纖維化是所有形式的進(jìn)展性腎病的最終共同病理途徑，其發(fā)展與小管間質(zhì)區(qū)域細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的過度積累和降解不足有關(guān)。目前有效治療腎纖維化的方法有限，主要涉及透析和非特異性藥物，這些藥物不能逆轉(zhuǎn)與腎纖維化相關(guān)的病理過程。

M1巨噬細(xì)胞具有表面標(biāo)志物CD86的特征，能夠促進(jìn)一氧化氮（NO）和幾種促炎介質(zhì)（如白細(xì)胞介素-6（IL-6）和腫瘤壞死因子-α（TNF-α））的產(chǎn)生。隨后，這會導(dǎo)致腎損害。相反，M2巨噬細(xì)胞通過表面標(biāo)記物（如CD206）和分泌細(xì)胞因子（如IL-10和轉(zhuǎn)化生長因子β（TGF-β））來識別，這些細(xì)胞因子有助于組織修復(fù)、傷口愈合、抗炎過程和免疫調(diào)節(jié)。由于巨噬細(xì)胞具有明顯的異質(zhì)性，靶向特異性巨噬細(xì)胞亞群可能成為CKD患者潛在的治療策略。

溫陽消癥湯（WYXZ）是在多年臨床經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上研制而成的中藥復(fù)方。包括七種中草藥（通過https://www.worldfloraonline.org)黃芪30 g，黨參30 g，淫羊藿15 g，肉蓯蓉15 g，桃仁 15 g。12 g、川芎15 g、莪術(shù)30 g。WYXZ中所有成分藥材的劑量均嚴(yán)格符合《中國藥典》（中國藥典委員會，2020）中規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)，或已通過包括中國科學(xué)院院士和國家中醫(yī)藥大師在內(nèi)的中醫(yī)臨床領(lǐng)軍專家的驗(yàn)證。在中醫(yī)理論中，WYXZ旨在補(bǔ)氣、溫陽、活血化瘀——?dú)v史上用于治療“腎陽虛”和“血瘀”綜合征的治療原則，其臨床表現(xiàn)與現(xiàn)代CKD表現(xiàn)相匹配，如水腫、疲勞和腎功能不全。WYXZ的現(xiàn)代臨床應(yīng)用驗(yàn)證了這些傳統(tǒng)用途。我們的隨機(jī)試驗(yàn)表明，WYXZ通過顯著降低尿素氮、血肌酐和尿纖維化因子TGF-β1水平，同時增加估計腎小球?yàn)V過率（eGFR）和血清白蛋白水平，有效且安全地增強(qiáng)3期慢性腎臟病（CKD）患者的腎功能。（Zhou等人，2024年）。動物實(shí)驗(yàn)表明，WYXZ改善了5/6腎切除小鼠的腎功能和腎纖維化誘導(dǎo)的病理變化，抑制了TGF-β1/smad3信號通路，并下調(diào)了ECM成分如I型膠原（Col-I）、III型膠原（Col-III）、α-平滑肌肌動蛋白（α-SMA）和纖維連接蛋白（FN）的表達(dá)。然而，其對巨噬細(xì)胞極化的影響尚不清楚。

本研究旨在探討WYXZ通過調(diào)節(jié)JAK2/STAT3信號通路調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞極化，發(fā)揮抗炎和抗纖維化作用的潛能。

【結(jié)果部分】

1.溫陽消癥湯 (WYXZ) 提取物的 HPLC 指紋圖譜。

2.WYXZ可改善5/6腎切除小鼠的腎功能和腎纖維化。

3.WYXZ調(diào)節(jié)纖維化腎巨噬細(xì)胞極化并抑制JAK2/STAT3活化。

4.WYXZ對LPS刺激RAW264.7細(xì)胞巨噬細(xì)胞極化及JAK2/STAT3信號通路的影響。

5.WYXZ通過抑制JAK2活化抑制RAW264.7細(xì)胞極化和炎癥因子分泌。

6.STAT3基因敲除可消除WYXZ介導(dǎo)的對RAW264.7細(xì)胞炎癥和巨噬細(xì)胞極化的抑制作用。

7.WYXZ通過抑制巨噬細(xì)胞JAK2/STAT3信號通路抑制HK-2細(xì)胞腎纖維化標(biāo)志物。

8.WYXZ通過JAK2/STAT3通路抑制巨噬細(xì)胞極化從而減輕腎臟炎癥和纖維化。

【結(jié)論與討論】

總之，本研究強(qiáng)調(diào)了巨噬細(xì)胞極化誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)在腎纖維化中的作用，并強(qiáng)調(diào)了JAK2/STAT3通路在這一過程中的中心作用。從治療角度來看，這些發(fā)現(xiàn)表明WYXZ通過抑制JAK2/STAT3信號通路調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞極化，從而顯著增強(qiáng)5/6腎切除小鼠的腎功能，最終抑制炎癥反應(yīng)并減輕纖維化（圖8）。提示W(wǎng)YXZ是治療CKD腎纖維化的有效藥物。

注：本文原創(chuàng)表明為原創(chuàng)編譯，非聲張版權(quán)，侵刪！

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