干細胞治療的安全基石：淺析人源病毒控制策略與高質量培養基方案

一份詳盡的病毒檢測報告背后，是生物科技企業對細胞治療安全底線的堅守。

在全球范圍內，細胞治療領域正在以前所未有的速度發展。根據國際細胞與基因治療協會的數據，截至2024年底，全球已有超過2000項細胞治療臨床試驗正在進行中。

一項來自國家工程研究中心的權威公告：近日，國家藥監局發布了《關于適用Q5A(R2):來源于人或動物細胞系生物技術產品的病毒安全性評價》的指導原則，明確規范了生物技術產品的病毒安全性評價工作。

這一規定背后，是對歷史上多起生物制品病毒污染事件的深刻反思。

01 病毒來源

FDA在2024年的指南中明確指出，生產細胞和基因治療產品時使用的人源和動物源材料可能引入包括病毒在內的外源因子。

干細胞制劑中人源病毒的來源遠比想象中復雜。這些潛在的病毒污染可能源自多個環節。

最直接的來源是供體本身，如果供體攜帶某些潛伏性病毒，如巨細胞病毒、EB病毒等，這些病毒可能隨著細胞一同進入制備流程。

其次是制備過程中使用的各種生物材料，特別是傳統培養基中添加的血清成分。即使是經過篩選的胎牛血清，也可能攜帶動物源病毒，進而污染細胞產品。而無血清培養基中添加的人血小板裂解物也是高風險的病毒污染來源。

此外，操作環境和人員也是不可忽視的污染源。在開放的操作環節中，環境中的微生物或操作人員攜帶的病毒可能意外引入。

這些潛在威脅的存在，使得干細胞制劑從制備之初就面臨著病毒污染的風險。

02 安全控制

病毒污染對干細胞制劑的安全性構成嚴重威脅。歷史上曾有HIV病毒、乙肝病毒污染血液制品，并通過共用注射器導致疾病大規模傳播的惡性事件。

在細胞治療領域，病毒污染不僅可能導致產品安全性風險，在臨床上產生嚴重后果，還可能對生物制品的生產過程、環境和操作者帶來安全風險。

從監管角度看，國家藥品監督管理局藥品審評中心對藥物的工藝規范、監督監管提出了嚴格要求。2019年至2021年，NMPA發布的生物制品指導原則數量顯著增加，顯示出對此問題的高度重視。2024年，中國國家藥監局藥品審評中心進一步強化了對細胞治療產品病毒安全性的審評要求，將病毒控制列為IND申報的核心審查項。

對于干細胞制劑而言，病毒安全性控制不僅關乎患者安全，也是產品能否通過審批、進入臨床的關鍵因素。例如，某細胞龍頭企業的人臍帶間充質干細胞注射液，在通過嚴格的病毒檢測后，才獲得國家藥監局藥品評審中心的審批，進入臨床試驗階段。這一教訓凸顯了病毒控制在細胞治療產品開發中的關鍵地位。

03 檢測方法

干細胞制劑中人源病毒的檢測種類多樣，主要包括對引起免疫缺陷性疾病和肝炎的人源病毒檢測，如HIV、乙肝、丙肝等。

從檢測方法來看，目前常見的病毒檢測方法包括：

細胞培養法：如細胞培養直接觀察法、體外不同傳代細胞培養及血吸附/血凝試驗。這類方法可以直接檢測活病毒的存在。

分子生物學方法：如聚合酶鏈式反應(PCR)，可用于檢測特定病毒的核酸序列。熒光定量RT-PCR法能夠檢測HCV、HIV-1/2、HTLV-1/2等RNA病毒，靈敏度可達10～100拷貝/μL。

免疫學方法：如ELISA等，用于檢測病毒特異性抗原或抗體。

特定病毒檢測：包括特殊人源病毒檢測、牛源病毒檢測、豬細小病毒檢測、逆轉錄病毒檢測等。

隨著測序技術的發展，新一代測序技術為病毒檢測帶來了革命性突破。NGS技術能夠同時對數十萬到數百萬條DNA分子進行序列測定，極大提高了檢測效率。

tNGS (靶向測序)可精準鎖定預設病原體目標，通過雜交捕獲或超高多重PCR靶向富集特定病原體序列。靈敏度高，可檢測低至1ng的DNA；工作流程可在24小時內完成。

04 華辰策略

蘇州華辰生物基于對干細胞制劑安全性的深刻理解，構建了一套多層次、全方位的病毒控制策略。

華辰方案真正的創新之處在于，將tNGS技術整合到了原料質量控制的核心環節。

對于培養基中的關鍵重組人源蛋白原料和人血小板裂解物，華辰生物不僅依靠供應商的合格證明，更是每一批次都送至獲得CNAS和CMA資質的權威第三方實驗室，進行tNGS病毒篩查。

這種“靶向追蹤”式的檢測，能夠針對干細胞制備過程中最可能引入的病毒風險，進行深度、精準的掃描，確保即使極微量的病毒核酸也能被檢出。

華辰生物的tNGS檢測方案覆蓋了包括DNA病毒48種，RNA病毒75種與干細胞治療安全密切相關的病毒，檢測靈敏度達到行業領先水平。根據國際文獻，類似的NGS方法檢測病毒載量的結果與傳統金標準方法高度一致，平均差異僅在0.2-0.5 log10范圍內。

公司還從源頭著手，自主研發了化學成分完全限定的無血清培養基，徹底消除了通過血清引入病毒的風險。與傳統的含血清培養基相比，這種培養基不僅提高了細胞培養的一致性，還避免了細胞通過內吞作用攝取異種蛋白引發的潛在免疫反應。

05 質量承諾

華辰生物對病毒安全性的承諾不僅停留在技術層面，更體現在每一套出廠產品的質量保證上。

與市場上多數干細胞培養基供應商不同，華辰生物的每一套間充質干細胞無血清培養基都附帶由權威第三方檢測機構出具的病毒檢測報告。

這份報告不僅是產品安全的證明，更是客戶進行IND申報時的關鍵技術文件。

從監管角度，NMPA在審評細胞治療產品時，特別關注原料的病毒安全性控制。擁有第三方檢測報告的培養基，能夠顯著簡化IND申報中關于原料安全性的論證過程，為客戶節省寶貴的時間和資源。

這種“檢測報告隨產品”的模式，體現了華辰生物對產品質量的自信，也為下游細胞治療企業提供了實實在在的便利和價值。

在蘇州華辰生物的質量控制實驗室內，技術人員正仔細審核最新一批培養基的tNGS檢測報告。屏幕上滾動的數據，是超過20種病毒檢測的“全陰性”結果。

從傳統血清培養到化學成分限定的無血清培養，從單一病毒檢測到tNGS全面篩查，干細胞制備技術正在經歷一場深刻的安全革命。

這份附在每一套培養基旁的檢測報告，不僅是一張紙，更是連接干細胞從實驗室走向臨床的安全橋梁。

從傳統的血清培養到無血清培養，干細胞制備技術正在經歷一場安全革命。而在這場革命中，嚴格的病毒控制策略和高品質的培養基，是干細胞療法從實驗室走向臨床的安全橋梁。