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      表達穩(wěn)轉(zhuǎn)株的常見分類與應(yīng)用解析

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      表達穩(wěn)定細胞株(Expression Stable Cell Lines)是指通過基因工程手段,將特定基因序列整合到宿主細胞染色體上,使目的基因能夠在宿主細胞內(nèi)長期且穩(wěn)定表達的細胞模型。

      主要分類

      組成型報告基因穩(wěn)定細胞系

      原理:通過引入熒光蛋白(如GFP、RFP、YFP、mCherry)或luciferase等報告基因到細胞基因組中,并利用CMV、EF1a等組成型啟動子驅(qū)動報告基因持續(xù)穩(wěn)定表達。

      應(yīng)用:細胞定位示蹤、體內(nèi)/外成像、藥物篩選等領(lǐng)域。

      吉滿服務(wù)

      吉滿生物具備特有的熒光素酶報告基因系統(tǒng),并基于藥物作用機制(MOA)構(gòu)建出的螢火蟲熒光素酶(Firely luciferase)報告基因細胞系產(chǎn)品具有靈敏度高、穩(wěn)定性好、操作簡單等優(yōu)點,助力研究人員對小分子藥物、單抗、雙抗等藥物的體外生物學(xué)活性評價。

      信號通路元件穩(wěn)定細胞系

      原理:通過將信號通路相關(guān)元件(如信號受體、轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件、啟動子等)穩(wěn)定整合到細胞中,以監(jiān)測和研究特定信號通路的活性和調(diào)控。

      應(yīng)用:常見的信號通路有NFkB, STAT, AP1, NFAT等,這些信號通路與多種疾病的發(fā)生和治療有關(guān),因此與其相關(guān)的穩(wěn)定表達細胞系在基礎(chǔ)科研與藥物篩選中起著重要的作用。

      吉滿服務(wù)

      吉滿生物能夠為客戶構(gòu)建高質(zhì)量的穩(wěn)定細胞系,產(chǎn)品涵蓋NF-B、NFAT、AP1、CRE、IL2-promoter、STATs、SMAD等重要信號通路元件。基于luciferase報告基因,有力支持信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路研究、配體結(jié)合特性分析、靶點藥物開發(fā)以及基因功能探索等多個領(lǐng)域。

      腫瘤特異性抗原表達穩(wěn)定細胞系

      原理:腫瘤組織本身是多種細胞的混合體,基因表達雜亂無章。通過構(gòu)建過表達穩(wěn)定細胞系,研究人員可以在純凈的背景下,研究目標基因如何影響腫瘤細胞的增殖、遷移、侵襲、死亡等惡性行為及相關(guān)信號通路。同時,這種表達特定腫瘤抗原的穩(wěn)定細胞系還可用于驗證該抗原作為預(yù)后指標或治療靶點的可行性。

      穩(wěn)定表達特定腫瘤抗原的工程細胞系構(gòu)建及應(yīng)用



      應(yīng)用:不僅適用于高通量篩選和評估靶向藥物的體外生物學(xué)活性,還能有效評價CAR-T細胞、TCR-T細胞等免疫細胞的殺傷活性和特異性。此外,該細胞系也為研究腫瘤細胞與周圍細胞(如成纖維細胞)之間的相互作用提供了有力工具。

      吉滿服務(wù)

      吉滿生物可為抗腫瘤藥物的研發(fā)提供了穩(wěn)定細胞系這一關(guān)鍵工具 ,產(chǎn)品覆蓋EGFR、STEAP1、VEGF、PD1-PDL1等重要的腫瘤相關(guān)靶點,全面支持相關(guān)藥物的體外活性驗證,助力推動腫瘤免疫治療研究與發(fā)展。

      激酶穩(wěn)定細胞系

      在激酶研究中,構(gòu)建能穩(wěn)定表達特定激酶(包括野生型或疾病相關(guān)突變型)的細胞系,是破解激酶功能、開發(fā)靶向藥物的核心實驗策略。這類細胞系為在均一細胞背景下研究特定激酶的生物學(xué)功能、進行高通量藥物篩選以及評估耐藥機制提供了關(guān)鍵且可靠的工具。

      吉滿服務(wù)

      吉滿生物可提供覆蓋眾多重要激酶靶點(如EGFR、KRAS、INSR、c-Kit:SCF、BTK、MUSK等)的穩(wěn)定細胞系產(chǎn)品與服務(wù)。這些細胞系采用優(yōu)化的表達系統(tǒng),確保激酶能夠穩(wěn)定、高效地表達,并保持良好的生物學(xué)活性,可直接用于激酶抑制劑的劑量反應(yīng)曲線測定和體外藥效學(xué)評價,為激酶靶向藥物的研發(fā)提供關(guān)鍵工具。

      免疫相關(guān)細胞系

      原理:通過基因工程技術(shù),將特定的免疫分子(如免疫檢查點蛋白、細胞因子受體、抗原提呈相關(guān)分子等)穩(wěn)定整合到宿主細胞基因組中,使細胞能夠持續(xù)表達這些功能蛋白。



      癌癥治療中的免疫檢查點及其抑制劑圖源doi: 10.2147/BCTT.S175360



      癌癥治療中的免疫檢查點及其抑制劑

      應(yīng)用:為研究免疫應(yīng)答的啟動、調(diào)控機制以及進行免疫藥物篩選提供理想的實驗?zāi)P汀?/p>

      吉滿服務(wù)

      吉滿生物可提供上百種免疫相關(guān)穩(wěn)定細胞系構(gòu)建服務(wù),涵蓋共刺激/抑制分子(如B7/CD28家族、TNF受體家族、PD-1、CTLA-4等)、免疫檢查點、模式識別受體、細胞因子及其受體等多個重要免疫靶點家族。可直接用于免疫調(diào)節(jié)機制研究、免疫藥物活性評價以及免疫逃逸機制解析等實驗。

      風(fēng)險提示:細胞授權(quán)合規(guī)性不可忽視

      使用未經(jīng)授權(quán)或來源不明的的細胞系進行實驗,不僅可能涉及知識產(chǎn)權(quán)風(fēng)險,還可能因細胞系的遺傳背景不明確、存在潛在污染等問題,影響研究結(jié)果的準確可靠與否。

      在生物藥研發(fā)領(lǐng)域,國內(nèi)外藥品監(jiān)管機構(gòu)在受理新藥臨床試驗申請(IND)和生物制品許可申請(BLA)時,要求對用于藥物活性測定、毒理學(xué)研究、質(zhì)量控制(QC)放行等關(guān)鍵環(huán)節(jié)的細胞株,提供清晰的來源證明和合法的商業(yè)化授權(quán)文件,非授權(quán)或來源不明的細胞則無法提供要求文件,可能導(dǎo)致申報資料被拒絕。

      因此,建議在選購或定制過表達穩(wěn)定細胞株時,優(yōu)先選擇能夠提供清晰、完整的細胞株溯源文件以及合法商業(yè)化授權(quán)證明的供應(yīng)商。



      客戶定制案例



      使用吉滿生物構(gòu)建的CCR2-RFP過表達細胞系轉(zhuǎn)染HEK293T細胞,經(jīng)WB驗證,目的基因表達極顯著上調(diào);亞細胞定位結(jié)果顯示其位于細胞膜上。(Advanced Science, 2024, 11(24): e2306675. IF=14.299,Q1)



      吉滿生物構(gòu)建目的基因dcas9-SAM胃癌細胞A(左)和胃癌細胞B(右),經(jīng)RT-qPCR驗證:目的基因上調(diào)倍數(shù)分別達20和30倍以上。



      使用吉滿生物構(gòu)建的MGC-803 PCSK9過表達細胞系,經(jīng)WB驗證,目的基因表達量極顯著上調(diào)。

      吉滿服務(wù)



      細胞授權(quán)合規(guī)性保障

      吉滿生物已獲得HEK293、Jurkat、CHO-K1細胞商業(yè)化使用授權(quán)及HEK293中國內(nèi)地定向用途獨家分授權(quán)代理資格,可提供合規(guī)性授權(quán)解決方案。為客戶早期研發(fā)到產(chǎn)品上市保駕護航。

      專業(yè)技術(shù)平臺一站式服務(wù)

      依托成熟的慢病毒包裝平臺與基因編輯技術(shù),吉滿生物現(xiàn)已布局近400個靶點,擁有近1500株現(xiàn)貨單克隆細胞株資源。可針對客戶需求定制多種過表達穩(wěn)定細胞系,覆蓋肝癌、肺癌、白血病、等關(guān)鍵靶點。

      技術(shù)團隊深耕科研服務(wù)領(lǐng)域十四年,擅長不同基因及細胞系的構(gòu)建項目,從項目咨詢到售后支持,均提供專業(yè)的技術(shù)指導(dǎo),解決客戶在細胞培養(yǎng)和使用過程中遇到的各種問題。

      嚴格質(zhì)量控制

      遵循ISO9001認證的質(zhì)量體系和嚴格的病毒純化工藝,從載體構(gòu)建到單克隆篩選,每個環(huán)節(jié)都實施嚴格的質(zhì)量控制,確保交付的細胞株性能穩(wěn)定可靠。

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