同樣是沉淀法，為什么師姐提取的外泌體又多又好？

大概每個做外泌體提取的科研人都踩過沉淀法的坑：

• 純度不達標：明明嚴格按步驟操作，提取物里還是有蛋白、雜質，純度不達標；

• 假陽性結構：后續 WB 檢測條帶模糊、電鏡觀察背景雜亂，甚至出現假陽性結果；

• 不同樣本不兼容：不同樣本（組織、血清、植物等）的雜質類型天差地別，單純靠通用沉淀試劑，換個樣本就翻車，根本沒法精準去除雜質……

雖然沉淀法操作簡單、成本低、還能快速針對大量樣本完成提取，但很多人忽略了沉淀法的核心是通過試劑改變滲透壓，讓外泌體快速沉降，但這個過程根本沒法區分外泌體和蛋白、核酸等雜質，因此單純的沉淀試劑純度不會太好。想要獲得干凈的外泌體，就要從源頭減少雜質干擾，針對不同樣本類型選對專屬試劑盒，宇玫博生物自主開發的外泌體提取純化試劑盒，適用于組織、細胞上清、血清血漿、乳液、尿液以及其他體液等多種樣本，已有七百余篇發表文章支持，點擊下方即可申請免費試用，獲取外泌體提取解決方案 >>

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那到底該怎么確保外泌體的提取質量，徹底避開這些坑呢？核心就抓兩個關鍵環節，也是宇玫博外泌體提取純化試劑盒的設計邏輯：

• 樣本處理：初始樣本雜質越少，沉淀得到的外泌體自然越干凈。而不同樣本（組織、血清、植物等）的雜質類型天差地別，所以沉淀法去除雜質的核心在于針對性的樣本獲取規范 + 專屬預處理流程。

• 后期除菌：除菌和去除大囊泡這兩步常常被很多人忽略，這樣不僅容易出現污染，還會讓大囊泡混入導致假陽性結果，常見的 WB 條帶模糊、電鏡背景雜亂，往往和這兩個因素有關。

不同樣本，如何確定處理方案？

1

細胞樣本

細胞樣本處理的關鍵在于前期培養，常規培養基含血清蛋白，易與外泌體共沉淀；樣本雜質會增加后續提取難度，影響純度。

因此建議采用外泌體專用培養基。在李一星教授和周磊教授團隊共同發表的文章中，團隊就采用搭配試劑盒專用化學成分限定培養基（低蛋白含量），所提取的外泌體純度高、得率穩定，很好的適配了細胞共孵育、組學研究等下游實驗[1]。

2

血液樣本（血清/血漿）

血清/血漿樣本中高豐度雜蛋白、代謝廢物多，雜質成分復雜，通用試劑難以精準去除。

通過差異化預處理能夠很好的解決這個問題，魏從文教授團隊采用 Umibio 血清-血漿外泌體提取純化試劑盒，高效去除血清雜蛋白，提取的外泌體支撐了結直腸癌肝轉移研究，適配蛋白組學分析需求[2]。

3

組織樣本（心肌、肝臟等）

這些組織質地致密難破碎，易殘留組織碎屑、胞內蛋白等雜質；無菌控制難度高，易出現污染和假陽性。

因此在處理樣本時需要先進行組織破碎與雜質分離，協和醫院程敏教授團隊，用 Umibio 組織外泌體提取試劑盒處理小鼠組織樣本，經酶解、專用試劑孵育等步驟去除雜質，提取的外泌體通過 TEM、NTA 鑒定，在心肌纖維化研究中起到了重要作用[3]。

4

植物樣本

植物樣本細胞壁結構堅固，且富含色素、多糖、多酚及次生代謝物等多種干擾物質，使得囊泡的完整提取與高純度獲取難度加大，而且植物樣本種類較多，不同部位的樣本提取方法也存在差異。

因此在處理時，針對不同種類的植物樣本，有效破解細胞壁并高效去除各類雜質是關鍵，可以選用 Umibio 植物囊泡提取試劑盒對植物組織進行預處理，不僅針對果實、花/葉、根莖、干品植物(花、根莖、種子)、大型真菌等五大類研發了「專屬」試劑盒，更能通過優化的酶解方法與專用純化試劑相結合，能夠溫和釋放囊泡并深度去除多糖、蛋白等污染物。

除此之外還有細胞上清、尿液等其他樣本，宇玫博生物自主開發的外泌體提取純化試劑盒也都有解決方案。

特別值得一提的是，如果研究涉及到深度蛋白組學、代謝組學分析或者想讓電鏡下外泌體形態更清晰，還可以采用聯用法進行外泌體提取，比如沉淀 + 超離、沉淀 + SEC 等，進一步減少微量雜質對高精度實驗的干擾。如果你也有更高的實驗要求，點此申請免費試用，把雜質多、得率低等問題交給我們吧！

內容策劃：鄒禮平

內容審核：吳軍

題圖來源：圖蟲創意

參考文獻：

[1]. HLF and PPARαaxis regulates metabolic‐associated fatty liver disease through extracellular vesicles derived from the intestinal microbiota. Imeta. 2025 Apr 07;4(2):e70022.

[2]. GP73-dependent regulation of exosome biogenesis promotes colorectal cancer liver metastasis. Molecular Cancer. 2025 May 26;24(1):151.

[3]. Lung-Derived Small Extracellular Vesicles Containing miR-15a-5p/miR-96-5p Promote Myocardial Fibrosis in Hypertrophic Cardiomyopathy via Targeting SMAD7. small. 2025 July 31:e01610.