【無菌附錄第七十八條】建立有效的潔凈區(qū)靜態(tài)與動態(tài)環(huán)境監(jiān)測體系

無菌附錄條款：

第七十八條潔凈區(qū)級別確認(rèn)是潔凈區(qū)確認(rèn)的一部分。潔凈區(qū)的級別確認(rèn)時應(yīng)當(dāng)分別測量≥0.5μm和≥5μm的顆粒的總數(shù)。測試需要在“靜態(tài)”和“動態(tài)”操作環(huán)境中進(jìn)行。級別確認(rèn)活動應(yīng)當(dāng)避免對工藝或產(chǎn)品質(zhì)量造成任何影響。初始級別確認(rèn)建議在模擬操作期間進(jìn)行，重新級別確認(rèn)建議在模擬操作期間或無菌工藝模擬試驗期間進(jìn)行。

潔凈區(qū)確認(rèn)的核心：動靜結(jié)合，雙粒徑監(jiān)控。 遵循GMP第七十八條，潔凈區(qū)級別確認(rèn)需在靜態(tài)（設(shè)施空載）與動態(tài)（模擬/實際生產(chǎn)）狀態(tài)下，同步測量≥0.5μm（系統(tǒng)性能指標(biāo)）和≥5μm（污染風(fēng)險指標(biāo)）懸浮粒子濃度。此要求是評估環(huán)境控制有效性和建立科學(xué)監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)。下面北京中邦興業(yè)小編，跟大家詳細(xì)分享一下相關(guān)條款的解讀。

核心概念：動態(tài) vs 靜態(tài)

1. 靜態(tài)：

定義：設(shè)備已安裝完畢并按用戶和供應(yīng)商同意的方式運行，但現(xiàn)場沒有操作人員。

目的：評估潔凈室本身在“空載”狀態(tài)下達(dá)到設(shè)計潔凈級別的能力（HVAC系統(tǒng)性能、建筑密封性等）。是級別確認(rèn)的基礎(chǔ)。

要求：所有潔凈級別（A, B, C, D）都必須進(jìn)行靜態(tài)測試以滿足相應(yīng)級別的標(biāo)準(zhǔn)。

2. 動態(tài)：

定義：設(shè)施/設(shè)備以規(guī)定的操作模式運行，并且有規(guī)定數(shù)量的人員在場并以規(guī)定的方式進(jìn)行操作的狀態(tài)。模擬或?qū)嶋H生產(chǎn)正在進(jìn)行。

目的：評估在實際生產(chǎn)條件下（人員活動、設(shè)備運行、物料流動等干擾因素存在時）環(huán)境維持可接受狀態(tài)的能力。反映實際運行風(fēng)險。

要求：

A級 & B級：必須進(jìn)行動態(tài)監(jiān)測以滿足其嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)。

C級：通常也建議進(jìn)行動態(tài)監(jiān)測（雖然法規(guī)可能未像AB級那樣強制要求所有點位，但基于風(fēng)險通常需要）。

D級：法規(guī)不規(guī)定統(tǒng)一的動態(tài)粒子限度標(biāo)準(zhǔn)（“不作統(tǒng)一規(guī)定”）。但這絕不等于不需要做動態(tài)監(jiān)測（“不作規(guī)定≠不用做”）。企業(yè)必須根據(jù)風(fēng)險評估和日常監(jiān)測數(shù)據(jù)自行確定其動態(tài)可接受標(biāo)準(zhǔn)。

關(guān)鍵要求解讀與操作要點：

1. 級別確認(rèn)（Qualification）：

顆粒物要求：必須測量 ≥0.5μm 和 ≥5μm 的懸浮粒子總數(shù)。

狀態(tài)要求：必須在 靜態(tài) 和 動態(tài) 兩種狀態(tài)下進(jìn)行測試。

避免影響：確認(rèn)活動本身不能對產(chǎn)品或工藝造成污染風(fēng)險。

時機：

初始確認(rèn)：推薦在模擬操作期間進(jìn)行（如培養(yǎng)基灌裝前/期間）。

再確認(rèn)：推薦在模擬操作期間或無菌工藝模擬試驗（培養(yǎng)基灌裝）期間進(jìn)行。這能更真實反映生產(chǎn)狀態(tài)下的環(huán)境表現(xiàn)。

2. ≥5μm 顆粒物的作用：

如果有充分的CCS（污染控制策略）依據(jù)或歷史趨勢數(shù)據(jù)支持，可以將 ≥5μm 顆粒物水平作為潔凈區(qū)分級的參考標(biāo)準(zhǔn)之一。它通常與微生物污染風(fēng)險關(guān)聯(lián)性更強。

3. D級動態(tài)限度的制定（核心難點）：

法規(guī)現(xiàn)狀：無全國/全球統(tǒng)一強制標(biāo)準(zhǔn)（“不作統(tǒng)一規(guī)定”）。

企業(yè)責(zé)任：必須自行制定科學(xué)合理的動態(tài)標(biāo)準(zhǔn)。依據(jù)是：

風(fēng)險評估：基于生產(chǎn)工藝、產(chǎn)品特性、暴露風(fēng)險等進(jìn)行。

歷史數(shù)據(jù)：持續(xù)日常監(jiān)測積累的數(shù)據(jù)是制定和修訂標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)。

不作規(guī)定≠不用做”：必須進(jìn)行D級動態(tài)監(jiān)測！目的是收集數(shù)據(jù)、評估風(fēng)險、建立標(biāo)準(zhǔn)、持續(xù)監(jiān)控。

制定D級動態(tài)標(biāo)準(zhǔn)的策略：

監(jiān)測點位評估：基于工藝風(fēng)險評估確定哪些D級區(qū)域/點位需要監(jiān)測以及監(jiān)測頻率。高風(fēng)險區(qū)域優(yōu)先且標(biāo)準(zhǔn)更嚴(yán)。例如：

高風(fēng)險：產(chǎn)品直接暴露、粒子可能進(jìn)入產(chǎn)品且后續(xù)工序無法去除的區(qū)域（如配料、敞口容器轉(zhuǎn)運）。標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)從保護(hù)產(chǎn)品的需求反推。

中/低風(fēng)險：非產(chǎn)品暴露區(qū)、有后續(xù)去除步驟的區(qū)域。標(biāo)準(zhǔn)可相對寬松。

首次確認(rèn)：對于A/B級，在沒有歷史數(shù)據(jù)和明確CCS要求的情況下，首次確認(rèn)主要是**測試并記錄數(shù)據(jù)（≥0.5μm & ≥5μm），無需立即設(shè)定嚴(yán)格的動態(tài)“通過/失敗”評價標(biāo)準(zhǔn)（但需滿足GMP附錄1靜態(tài)標(biāo)準(zhǔn)）。這些數(shù)據(jù)作為后續(xù)分析的基線。

日常環(huán)境監(jiān)測：

持續(xù)收集數(shù)據(jù)：制定詳細(xì)的監(jiān)測計劃（日期、房間、點位、項目 - 粒子、微生物、壓差、溫濕度等）。

計劃性：“當(dāng)天無動態(tài)生產(chǎn)就不要安排（動態(tài)監(jiān)測）計劃” - 動態(tài)監(jiān)測只在有生產(chǎn)活動時進(jìn)行。

CCS分析：

將環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)（特別是粒子、微生物）與CCS的其他要素（如：微生物限度檢測結(jié)果/OOS/OOT、產(chǎn)品外觀檢查結(jié)果/OOS/OOT、無菌檢查結(jié)果、清潔驗證數(shù)據(jù)、人員監(jiān)測數(shù)據(jù)、設(shè)備故障記錄等）關(guān)聯(lián)分析。

判斷環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)是否預(yù)示或關(guān)聯(lián)了實際的污染風(fēng)險（如：粒子數(shù)升高時微生物是否超標(biāo)？特定點位微生物超標(biāo)是否與產(chǎn)品染菌相關(guān)？）。

分析是否發(fā)現(xiàn)了潛在的上市后風(fēng)險。

制定標(biāo)準(zhǔn)：

基于積累的歷史監(jiān)測數(shù)據(jù)。

重點分析粒子監(jiān)測數(shù)據(jù)與CCS識別的實際風(fēng)險（如微生物污染、產(chǎn)品不合格）之間是否存在相關(guān)性。

如果發(fā)現(xiàn)顯著相關(guān)性：

例如：當(dāng) ≥5μm 粒子數(shù)超過某個水平時，微生物超標(biāo)風(fēng)險顯著增加，或產(chǎn)品不合格率上升。

則應(yīng)根據(jù)這些歷史數(shù)據(jù)和風(fēng)險關(guān)聯(lián)性，科學(xué)地（如使用統(tǒng)計方法）制定該點位的動態(tài)粒子限度標(biāo)準(zhǔn)（警戒限、行動限、法定限）。這個標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)能有效控制識別的風(fēng)險。

標(biāo)準(zhǔn)是動態(tài)的：隨著數(shù)據(jù)積累、工藝變更、CCS優(yōu)化，標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)定期回顧和修訂。

動態(tài)與靜態(tài)監(jiān)測的意義

• 靜態(tài)（At Rest）：
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• 驗證“硬件”能力：主要驗證潔凈室基礎(chǔ)設(shè)施（建筑密封性）、空調(diào)凈化系統(tǒng)（HVAC）在安裝完畢、設(shè)備運行但無人員操作狀態(tài)下，是否能達(dá)到設(shè)計的潔凈度級別（如ISO 5/A級）。這是潔凈區(qū)基礎(chǔ)性能的證明。
• ≥0.5μm 是重點：靜態(tài)下≥5μm顆粒通常很少，重點在于確認(rèn)HVAC系統(tǒng)對基礎(chǔ)粒徑（≥0.5μm）顆粒的控制能力是否達(dá)標(biāo)。
• 動態(tài)（Operational/In Operation）：
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• 驗證“軟件”控制：模擬或?qū)嶋H生產(chǎn)過程中，評估在人員活動、設(shè)備運行、物料流動等干擾因素存在時，環(huán)境維持可接受狀態(tài)的能力。這反映了實際運行控制水平污染控制策略（CCS）的有效性。
• ≥5μm 更具風(fēng)險指示性：動態(tài)下≥5μm顆粒的數(shù)量更能敏感地反映人員操作、設(shè)備運行、物料處理等引入的污染風(fēng)險，是評估動態(tài)環(huán)境微生物污染潛在風(fēng)險工藝控制穩(wěn)健性的關(guān)鍵指標(biāo)。這也是為什么在制定動態(tài)標(biāo)準(zhǔn)（尤其是D級）時，風(fēng)險評估要重點考慮≥5μm顆粒與工藝/產(chǎn)品風(fēng)險的關(guān)系。

采樣點選擇與采樣量

• 基于風(fēng)險評估：采樣點的位置和數(shù)量應(yīng)基于房間布局、氣流模式、關(guān)鍵操作位置、人員活動頻率、設(shè)備復(fù)雜性、產(chǎn)品暴露程度等進(jìn)行風(fēng)險評估后確定。關(guān)鍵區(qū)域（如A級送風(fēng)下方、灌裝點、物料暴露點）和高風(fēng)險區(qū)域是重點。
• 采樣量要求：為了獲得具有統(tǒng)計學(xué)意義的結(jié)果，特別是對于≥5μm顆粒（因其在潔凈空氣中濃度可能很低），每個采樣點的單次采樣空氣量必須足夠大。ISO 14644-1規(guī)定了根據(jù)潔凈度級別所需的最小采樣量（Vs）。例如：
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• 確認(rèn)A級（ISO 5）：≥5μm粒子采樣量要求非常大（通常需要長時間采樣或大流量采樣器），以確保即使?jié)舛群艿鸵材軝z測到（或確認(rèn)低于限值）。
• 關(guān)鍵點：采樣量不足可能導(dǎo)致≥5μm顆粒“假陰性”（未測到不代表不存在），無法真實反映環(huán)境狀況。這是執(zhí)行第七十八條時容易被忽視的技術(shù)細(xì)節(jié)。

設(shè)備與方法

• 離散粒子計數(shù)器（DPC）：必須使用校準(zhǔn)合格的、能同時或分別計數(shù)≥0.5μm和≥5.0μm顆粒的光散射離散粒子計數(shù)器。
• 校準(zhǔn)與合規(guī)：粒子計數(shù)器需定期（通常每年）由有資質(zhì)的機構(gòu)按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)（如ISO 21501-4, JIS B 9921）進(jìn)行校準(zhǔn)，確保其測量精度和準(zhǔn)確性。日常使用前可能需要進(jìn)行自檢（如使用標(biāo)稱粒徑的粒子挑戰(zhàn)）。
• 等動力采樣頭：在單向流（A級）區(qū)域采樣時，應(yīng)使用等動力采樣頭，確保采樣氣流速度與主氣流速度匹配，避免采樣誤差。
• 潔凈室懸浮顆粒物監(jiān)測：各類型激光塵埃粒子計數(shù)器的功能與選擇

數(shù)據(jù)記錄與報告

• 詳盡記錄：必須詳細(xì)記錄采樣日期、時間、地點（房間、具體點位坐標(biāo)）、采樣狀態(tài)（靜態(tài)/動態(tài)）、采樣設(shè)備型號及編號、采樣流量、采樣時長、采樣量、各粒徑（≥0.5μm, ≥5.0μm）的粒子濃度（個/m3）、環(huán)境條件（溫濕度、壓差）等。
• 結(jié)果計算與判定：根據(jù)ISO 14644-1規(guī)定的方法計算每個采樣點的平均濃度，并與相應(yīng)潔凈級別的限值進(jìn)行比較。需要明確記錄每個點是否合格。
• 分級報告：級別確認(rèn)報告應(yīng)清晰說明潔凈區(qū)（或房間內(nèi)不同區(qū)域）最終被確認(rèn)達(dá)到的級別（A/B/C/D），該結(jié)論基于所有采樣點≥0.5μm和≥5.0μm顆粒的靜態(tài)和動態(tài)測試結(jié)果（均需滿足限值要求）。

與污染控制策略（CCS）的關(guān)聯(lián)

• 顆粒數(shù)據(jù)是CCS基石：≥0.5μm和≥5μm顆粒的監(jiān)測數(shù)據(jù)是CCS的核心要素之一，為評估環(huán)境受控狀態(tài)提供客觀證據(jù)。
• 風(fēng)險信號：≥5μm顆粒的動態(tài)數(shù)據(jù)異常升高（即使未超標(biāo)），應(yīng)視為潛在的風(fēng)險信號，觸發(fā)調(diào)查，并可能需要評估其對微生物監(jiān)測結(jié)果、產(chǎn)品無菌/微粒污染風(fēng)險的影響。這也是第七十八條強調(diào)“根據(jù)風(fēng)險評估和日常監(jiān)測的數(shù)據(jù)確定動態(tài)限度”以及將≥5μm顆粒作為CCS或歷史數(shù)據(jù)依據(jù)進(jìn)行分級參考的原因。
• 持續(xù)改進(jìn)：長期監(jiān)測這兩個粒徑的顆粒數(shù)據(jù)（尤其是動態(tài)數(shù)據(jù)），結(jié)合微生物監(jiān)測、人員監(jiān)測、壓差、溫濕度等數(shù)據(jù)，是評估CCS有效性持續(xù)改進(jìn)環(huán)境控制措施的重要依據(jù)。

總結(jié)：

動靜皆需：級別確認(rèn)和有效監(jiān)控必須包含靜態(tài)和動態(tài)。

粒子雙測：≥0.5μm 和 ≥5μm 粒子是基本要求。

D級動態(tài)是重點難點：法規(guī)不統(tǒng)一規(guī)定，但企業(yè)必須做、必須管、必須定標(biāo)。

風(fēng)險是核心：D級動態(tài)監(jiān)測的點位選擇、頻率設(shè)定、標(biāo)準(zhǔn)制定完全基于工藝風(fēng)險評估。

數(shù)據(jù)是基礎(chǔ)：首次確認(rèn)收集基線數(shù)據(jù)，日常監(jiān)測持續(xù)積累數(shù)據(jù)。

CCS是紐帶：環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)必須與CCS的其他風(fēng)險控制措施和結(jié)果（微生物、產(chǎn)品檢驗OOS/OOT等）關(guān)聯(lián)分析，才能證明其價值并制定有意義的動態(tài)標(biāo)準(zhǔn)。

標(biāo)準(zhǔn)源于關(guān)聯(lián)：D級動態(tài)粒子標(biāo)準(zhǔn)（尤其是≥5μm）的制定，應(yīng)基于歷史數(shù)據(jù)與CCS中識別的實際污染風(fēng)險之間的相關(guān)性分析。

遵循“基于風(fēng)險、數(shù)據(jù)驅(qū)動、關(guān)聯(lián)CCS”的原則，企業(yè)就能有效地建立和執(zhí)行符合法規(guī)要求且能真正保障產(chǎn)品質(zhì)量的潔凈區(qū)動態(tài)環(huán)境監(jiān)測體系。