復(fù)方1區(qū): 天津中醫(yī)藥大學(xué)團(tuán)隊(duì)揭示苓桂術(shù)甘湯可抑制MMP-9對(duì)LYVE-1切割,促進(jìn)淋巴管生成而改善心肌梗死

【寫在前面】：本期推薦的是由天津中醫(yī)藥大學(xué)、天津中醫(yī)藥大學(xué)中藥方劑藥理學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、天津中醫(yī)藥大學(xué)中藥組分國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室等研究團(tuán)隊(duì)合作近期發(fā)表于Phytomedicine(IF8.3）的一篇文章，揭示苓桂術(shù)甘湯可抑制MMP-9對(duì)LYVE-1切割,促進(jìn)淋巴管生成而改善心肌梗死。

【期刊簡(jiǎn)介】

【題目及作者信息】

Lingguizhugan decoction inhibits the cleavage of LYVE-1 by MMP-9 and promotes lymphangiogenesis to improve myocardial infarction

背景

心肌重塑在決定心肌梗死（MI）后患者的預(yù)后方面起著至關(guān)重要的作用。臨床前和臨床研究的新證據(jù)強(qiáng)調(diào)了心臟淋巴管生成在改善心肌梗死后心臟功能和預(yù)后方面的有益作用。苓桂術(shù)甘湯LD是一種中藥，廣泛用于治療缺血性心臟病。然而，其潛在機(jī)制尚不清楚。

目的

確定LD是否可以通過促進(jìn)淋巴管生成來(lái)增強(qiáng)心肌梗死后心肌重塑，并闡明其分子機(jī)制

方法

采用左前降支（LAD）手術(shù)結(jié)扎建立心肌梗死大鼠模型。通過組織病理學(xué)染色和超聲心動(dòng)圖評(píng)估心臟結(jié)構(gòu)和功能。使用轉(zhuǎn)基因斑馬魚模型證實(shí)淋巴管生成在LD的心臟保護(hù)作用中起著關(guān)鍵作用。進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析以預(yù)測(cè)LD治療MI的潛在機(jī)制。評(píng)估MI大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9）和淋巴管內(nèi)皮受體-1（LYVE-1）的表達(dá)水平。對(duì)心肌梗死患者進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組學(xué)數(shù)據(jù)挖掘和體外蛋白質(zhì)相互作用驗(yàn)證，以探索MMP-9和LYVE-1之間的關(guān)系。使用蛋白質(zhì)印跡和qRT-PCR分析了參與白細(xì)胞介素-17（IL-17）信號(hào)通路的關(guān)鍵蛋白。此外，進(jìn)行質(zhì)譜成像以鑒定LD中調(diào)節(jié)IL-17信號(hào)通路的潛在生物活性化合物。

結(jié)果

LD顯著改善了左前降支結(jié)扎大鼠的心功能，減輕了不良心肌重塑。值得注意的是，LD促進(jìn)了維拉帕米治療的轉(zhuǎn)基因斑馬魚的心臟淋巴管生成并改善了心臟功能，并使用淋巴管生成抑制劑進(jìn)行了進(jìn)一步驗(yàn)證。基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究結(jié)果和先前的研究，MMP-9和LYVE-1被確定為L(zhǎng)D的關(guān)鍵靶點(diǎn)。LD降低了心肌梗死大鼠心臟MMP-9的表達(dá)，增加了LYVE-1的水平。MMP-9和LYVE-1之間存在很強(qiáng)的相關(guān)性，表明存在潛在的調(diào)控關(guān)系。此外，LD下調(diào)了參與IL-17信號(hào)通路的關(guān)鍵蛋白，表明其在調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)中的作用。最后，在心臟組織中鑒定出四種生物活性化合物脫氫曲美酮酸、對(duì)甲氧基肉桂酸乙酯、白術(shù)和甘草甜素是IL-17R/M-9/LYVE-1軸的潛在調(diào)節(jié)因子，有助于LD的淋巴管生成促進(jìn)作用。

結(jié)論

LD通過促進(jìn)淋巴管生成和調(diào)節(jié)IL-17R/M-9/LYVE-1信號(hào)通路來(lái)增強(qiáng)心肌梗死后心室重構(gòu)。脫氫三苯甲酸、對(duì)甲氧基肉桂酸乙酯、白術(shù)和甘草甜素可能是LD治療效果的關(guān)鍵生物活性化合物。

圖文摘要

【前言】

心肌梗死（MI）是全球發(fā)病率和死亡率的主要因素，患病率越來(lái)越高。每年，全球有超過700萬(wàn)人經(jīng)歷心肌梗死。盡管介入和藥物治療（如血管成形術(shù)、支架置入術(shù)和輔助藥物治療）取得了顯著進(jìn)展，有效恢復(fù)了冠狀動(dòng)脈血流并降低了早期死亡率，但仍有一部分患者發(fā)生了惡性心室重塑。這種病理過程由廣泛的心肌壞死和受損的梗死修復(fù)驅(qū)動(dòng)，顯著增加了心力衰竭的風(fēng)險(xiǎn)，在嚴(yán)重的情況下，還會(huì)導(dǎo)致心臟破裂。令人擔(dān)憂的是，最近的研究表明，用于預(yù)防不良心室重塑的常規(guī)藥物β受體阻滯劑并不能顯著減少主要終點(diǎn)事件，特別是在心肌梗死和射血分?jǐn)?shù)（EF）保持不變的患者中。這些發(fā)現(xiàn)強(qiáng)調(diào)了創(chuàng)新治療以改善心肌梗死后預(yù)后的必要性。

苓桂術(shù)甘湯（LD）來(lái)源于張仲景的《金匱要略》，是一種廣泛用于治療缺血性心臟病的中藥。LD以其解決液體潴留、增強(qiáng)脾臟和促進(jìn)氣（能量）循環(huán)的治療特性而聞名。越來(lái)越多的證據(jù)表明，LD具有顯著的心臟保護(hù)作用，包括改善心臟功能、緩解心肌梗死相關(guān)癥狀和延緩心肌梗死后心力衰竭的進(jìn)展。從機(jī)制上講，LD通過減輕心肌梗死模型中的線粒體損傷和改善能量代謝來(lái)抑制心室重塑。然而，盡管LD在心肌梗死后心室重塑中的益處已被充分證明，但LD是否通過調(diào)節(jié)淋巴管生成來(lái)發(fā)揮其治療作用仍未得到探索。

在這項(xiàng)研究中，通過結(jié)扎左前降支（LAD）建立了心肌梗死模型，并評(píng)估了LD對(duì)心肌梗死后心室重塑的治療作用。我們使用Tg（Fli1:eGFP；gata1:dsRed）轉(zhuǎn)基因斑馬魚胚胎來(lái)探索LD的心臟保護(hù)作用是否與促進(jìn)淋巴管生成有關(guān)。隨后，我們利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)來(lái)鑒定LD在MI中潛在的淋巴相關(guān)靶點(diǎn)。基于這些發(fā)現(xiàn)，我們整合了對(duì)MI患者轉(zhuǎn)錄組譜的深入數(shù)據(jù)挖掘，驗(yàn)證了體外蛋白質(zhì)相互作用，并進(jìn)一步闡明了LD治療的分子機(jī)制。最后，為了驗(yàn)證LD對(duì)心肌梗死后心室重構(gòu)治療作用的生物活性化合物，我們進(jìn)行了全面的化學(xué)成分分析。

【結(jié)果部分】

1.采用HPLC -Q-Exactive Plus方法分析的LD標(biāo)準(zhǔn)離子色譜圖。

2.LD改善LAD處理大鼠的心功能障礙。

3.LD可緩解經(jīng)LAD處理的大鼠心臟損傷及不良重構(gòu)。

4.LD促進(jìn)健康轉(zhuǎn)基因斑馬魚的淋巴管生成。

5.淋巴管生成阻斷消除了LD的心臟保護(hù)作用。

6.網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)預(yù)測(cè)心肌梗死（MI）LD治療的關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)與信號(hào)通路。

7.LD調(diào)節(jié)LAD治療大鼠MMP-9和LYVE-1水平。

8.心肌梗死患者外周血中MMP-9與 LYVE -1的強(qiáng)相關(guān)性。

9.LYVE-1是MMP-9的直接底物。

10.KEGG 兩個(gè)臨床數(shù)據(jù)庫(kù)上調(diào)差異基因的富集分析。

11.LD對(duì)LAD處理大鼠IL-17信號(hào)通路及淋巴管生成相關(guān)蛋白的影響。

12.通過調(diào)節(jié)IL-17信號(hào)通路研究LD潛在的藥效學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)。

13.LD對(duì)MI治療作用的潛在機(jī)制示意圖。

【結(jié)論與討論】

總之，本研究從心臟淋巴管生成的角度提供了LD在心肌梗死治療潛力的實(shí)驗(yàn)證據(jù)。LD對(duì)淋巴管生成和心肌重塑的影響可能與IL-17R/MMP-9/ LYVE -1通路有關(guān)（圖13）。此外，我們通過結(jié)合 LYVE -1填補(bǔ)了MMP-9靶向淋巴管生成機(jī)制的先前空白。更重要的是，LD通過促進(jìn) VEGF -C/VEGFR3信號(hào)通路激活心臟淋巴管生成，可能作為一種協(xié)同機(jī)制。本研究還強(qiáng)調(diào)了可能負(fù)責(zé)心肌梗死有益效應(yīng)的活性化合物，這些化合物可能通過調(diào)節(jié)IL-17信號(hào)通路發(fā)揮作用。

注：本文原創(chuàng)表明為原創(chuàng)編譯，非聲張版權(quán)，侵刪！

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