PNAS丨丁強(qiáng)/王麟團(tuán)隊(duì)揭示戊型肝炎病毒復(fù)制和致病的關(guān)鍵宿主因子，為抗病毒藥物開發(fā)提供新靶點(diǎn)

戊型肝炎病毒（ Hepatitis E virus, HEV ）屬于單股正鏈 RNA 病毒，是全球急性病毒性肝炎的重要病原之一。世界衛(wèi)生組織數(shù)據(jù)顯示，全球每年約有 2000 萬例感染，導(dǎo)致數(shù)百萬例急性肝炎病例【 1】 。近年來研究進(jìn)一步指出， HEV 具有顯著的跨種傳播潛力和遺傳多樣性，被認(rèn)為是未來可能引發(fā)新發(fā)和突發(fā)傳染病的重要潛在病原體，其公共衛(wèi)生威脅正日益受到關(guān)注【2 】。在免疫功能正常人群中， HEV 感染多呈自限性，但在器官移植患者、免疫抑制人群以及孕婦中可引發(fā)嚴(yán)重甚至致命后果。尤其是在妊娠晚期， HEV 感染的病死率可高達(dá) 20%-30% ，對(duì)公共衛(wèi)生和母嬰健康構(gòu)成嚴(yán)重威脅【3 】。盡管我國(guó)已批準(zhǔn)使用 HEV 疫苗，但在全球范圍內(nèi)仍缺乏特異、有效的抗 HEV 治療藥物。這一現(xiàn)狀的核心原因在于：一方面， HEV 的復(fù)制依賴由 ORF1 編碼的大型病毒復(fù)制蛋白復(fù)合體，其形成和功能高度依賴復(fù)雜的病毒 - 宿主相互作用，但長(zhǎng)期缺乏穩(wěn)定、高效的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蛯?duì)這一過程進(jìn)行系統(tǒng)解析；另一方面， 缺乏便于遺傳操作且可穩(wěn)定支持 HEV 感染的小動(dòng)物模型，限制了對(duì)病毒生命周期、病毒 - 宿主互作及致病機(jī)制的深入解析，也制約了抗病毒靶點(diǎn)的發(fā)現(xiàn)與驗(yàn)證。

近日，清華大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院傳染病研究中心丁強(qiáng)課題組 聯(lián)合北京大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病原生物 學(xué) 系王麟課題組 在戊型肝炎病毒（ Hepatitis E virus, HEV ）研究領(lǐng)域取得重要進(jìn)展。研究團(tuán)隊(duì)系統(tǒng)鑒定并驗(yàn)證宿主蛋白 EIF4H 和 YBX1 在 HE V 復(fù)制及致病過程中的關(guān)鍵作用， 深化 對(duì) HEV 生命周期和致病機(jī)制的認(rèn)識(shí)， 并 為開發(fā)新的抗病毒治療策略提供重要理論基礎(chǔ)。相關(guān)研究成果以 EIF4H and YBX1 are essential host factors for hepatitis E virus replication and pathogenesis 為題，發(fā)表于 PNAS 。

研究團(tuán)隊(duì)首先建立了穩(wěn)定復(fù)制的 HEV 復(fù)制子（ replicon ）體系， 并 結(jié)合全 基因組 CRISPR 篩選，系統(tǒng)鑒定對(duì) HEV 復(fù)制重要的 宿主 因子 。這一策略突破了傳統(tǒng) HEV 研究模型的限制， 從而 實(shí)現(xiàn)對(duì)病毒復(fù)制依賴宿主因子的無偏篩選。研究發(fā)現(xiàn)， EIF4H 和 YBX1 是 HEV 復(fù)制所必需的關(guān)鍵宿主因子。進(jìn)一步機(jī)制研究表明， EIF4H 通過參與病毒復(fù)制復(fù)合物的組裝，維持病毒 子代 RNA 的高效合成；而 YBX 1 則調(diào)控病毒復(fù)制蛋白 ORF1 的加工成熟過程， 影響病毒 復(fù)制 機(jī)器的組裝 。為驗(yàn)證上述發(fā)現(xiàn)的生理相關(guān)性，研究團(tuán)隊(duì)不僅在多種肝癌細(xì)胞系中進(jìn)行系統(tǒng)驗(yàn)證，還引入人 iPSC 衍生的肝細(xì)胞模型。該模型更接近原代人肝細(xì)胞，為 HEV 研究提供更接近真實(shí)生理狀態(tài)的體外系統(tǒng)。更為重要的是，研究團(tuán)隊(duì)進(jìn)一步 分別 構(gòu)建了 EIF4H 敲除和 YBX1 敲除大鼠。 在 HEV 感染實(shí)驗(yàn)中，基因敲除大鼠表現(xiàn)出顯著降低的病毒復(fù)制和糞便排毒水平，并伴隨明顯減輕的肝臟病理損傷，從遺傳學(xué)層面證明了 EIF4H 和 YBX1 在體內(nèi) HEV 感染和致病過程中的關(guān)鍵作用 。

該研究不僅深化了對(duì) HEV 復(fù)制機(jī)制和致病過程的認(rèn)識(shí)，也為建立高效 HE V 感染的細(xì)胞模型 提供重要參考 。 同時(shí)， EIF4H 和 YBX1 作為病毒高 度依賴的宿主因子，為開發(fā)抗 病毒 藥 物提供 新的作用靶點(diǎn)。

該研究由清華大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院丁強(qiáng)課題組牽頭，聯(lián)合北京大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院王麟（共同通訊作者）、美國(guó)克利夫蘭醫(yī)學(xué) 中心吳 顯芳（共同通訊作者）、清華大學(xué)藥學(xué)院秦 為以及 普林斯頓大學(xué) Alexander Ploss 教授等團(tuán)隊(duì)共同完成，充分體現(xiàn)了在病毒學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、干細(xì)胞模型和動(dòng)物模型等方面的優(yōu)勢(shì)互補(bǔ) 。清華大學(xué)鞠曉輝（博士后，已出站）、董麟（博士生，已畢業(yè)）以及北京大學(xué) 劉天旭和 克利夫蘭醫(yī)學(xué)中心張璠為共同第一作者。

實(shí)驗(yàn)室簡(jiǎn)介： 丁強(qiáng)課題組聚焦威脅人類健康的重要 RNA 病毒，圍繞病毒復(fù)制調(diào)控、免疫逃逸機(jī)制 及跨種傳播 等關(guān)鍵科學(xué)問題，綜合運(yùn)用分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、功能基因 組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)等多學(xué)科技術(shù)手段，系統(tǒng)解析病毒感染過程中病毒 - 宿主相互作用的分子機(jī)制。研究旨在揭示病毒致病與適應(yīng)性進(jìn)化的基礎(chǔ)規(guī)律，為抗病毒藥物研發(fā)、疫苗設(shè)計(jì)及動(dòng)物模型構(gòu)建提供堅(jiān)實(shí)的理論依據(jù)與技術(shù)支撐。課題組近年來在 Cell 、 PNAS 、 PLoS Pathogens 、 mBio 等國(guó)際主流學(xué)術(shù)期刊發(fā)表論文 3 0 余篇，在病毒復(fù)制調(diào)控與免疫拮抗機(jī)制領(lǐng)域具有持續(xù)影響力。課題組常年招聘博士后和科研技術(shù)人員（有志攻讀博士學(xué)位者優(yōu)先考慮），歡迎具有相關(guān)背景的優(yōu)秀青年學(xué)者加入。

https://www.pnas.org/doi/10.1073/pnas.2529289123

來源：Bioart