研究結果表明,三七提取物有助于增強免疫反應,同時通過調節南美白對蝦腸道消化酶的活性來維持生長性能。
三七屬于五加科三七屬 ,是臨床常用的中藥材,對水產動物具有促進生長、免疫調節、抗菌等作用,具有提高生長速度、提高免疫力、增強抗病能力的作用。三七中已鑒定出皂苷、聚乙炔、甾醇、黃酮、多糖、環肽、氨基酸等200多種活性成分 。先前的研究表明,三七提取物可增強雜交石斑魚的生長和抗氧化能力。
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血細胞在蝦的免疫系統中發揮著關鍵作用,執行吞噬、儲存和釋放酚氧化酶原(proPO)等功能。酚氧化酶 (PO) 主要由 proPO 系統激活,產生具有殺菌特性的黑色素,促進外部傷口愈合并抵御病原體。在吞噬作用過程中,會產生活性氧(ROS),引起呼吸爆發(RB),從而促進吞噬作用和異物清除。此外,胰蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、糜蛋白酶等消化酶是蝦腸道內消化和營養吸收的重要指標。這是影響蝦的生長和抵抗力的重要因素。
該研究評估了三七提取物 (PNWE)對白對蝦免疫反應和消化酶功能的影響。此外,該研究還評估了腸道消化酶的活性和弧菌數量, 并觀察了肝胰腺和腸道的組織病理學。
一、研究方法:
平均重量為3.8±0.5g(平均值±SD)的白對蝦培養7天,飼喂體重8%的商業飼料(35% 粗蛋白),每天飼喂兩次。實驗過程中,實驗蝦(60尾/組)在裝有200L海水、鹽度為15‰的水槽中飼養;溫度24-26°C,pH值7.8-8。
將三七粉末加入無菌水(100g/L)中并在室溫下攪拌24小時,然后將混合物離心。收集上清液并通過0.45μm濾膜過濾。濾液蒸發并隨后冷凍干燥產生PNWE,產率51.94%。 PNWE樣品儲存于-80°C。
實驗組蝦注射不同濃度的三七提取物(PNWE)(50、100和200μg/g蝦)。約20μL PNWE,濃度9.5;將19或38mg/mL注射到白蝦的第二或第三腹節中,分別達到50、100和200μg/g體重的劑量。對照組給蝦注射鹽水(20μL)。在每個時間點(12、24、48、72、168和240 h),每組采集10尾蝦,分析免疫參數(THC、SGC、GC、HC、PO和RB、PR和PI活性)和腸道消化酶(包括胰蛋白酶、糜蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶)活性以及腸道內弧菌數量。 240小時后取肝胰腺和腸道樣本進行組織病理學觀察。
二、研究成果
根據顯微鏡觀察結果,注射不同濃度PNWE的蝦的GC、SGC和HC在240小時內均未觀察到變形或破損。 24-72小時后,注射100和200μg PNWE的蝦的THC明顯高于對照(p < 0.05);從24-240小時,注射不同PNWE濃度的蝦的GC和SGC百分比明顯高于對照組(p < 0.05),而HC百分比明顯低于對照組(p < 0.05)。在注射100和200μg PNWE 的蝦中觀察到GC比率增加最多(圖1)。
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12-240小時,不同濃度PNWE注射組的吞噬活性(RB)均明顯高于對照組。注射100和200μg PNWE 12-48小時后,蝦的RB最高。注射不同濃度PNWE的蝦在12至240小時內的PR和PI均明顯高于對照組。注射100和200 μg PNWE 的組中PI最高。從12-240小時,注射不同濃度PNWE的蝦的PO活性明顯高于對照組(圖2)。
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注射PNWE的蝦的胰蛋白酶活性高于對照組蝦(p<0.05),其中50和100μg/g蝦組在12-48小時內具有最高活性。 12-24小時,注射PNWE的蝦胰凝乳蛋白酶活性明顯高于對照組,其中50μg/g蝦組最高。從12-24小時,注射PNWE的蝦的淀粉酶活性明顯高于對照組(p<0.05),其中50μg PNWE在12小時時最高。從12-24小時,注射50μg PNWE的蝦的脂肪酶活性顯著高于對照(p<0.05)。
48小時后,注射100和200 μg/g PNWE蝦的腸道內弧菌數量明顯低于對照組(p < 0.05)。
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三、結論:
三七提取物通過增加HC、PO、RB和吞噬細胞活性來增強白蝦的免疫反應,同時通過調節腸道消化酶(胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶)的活性來維持生長性能。 PNWE是一種很有前景的蝦類免疫調節劑,有潛力促進未來水產養殖業的可持續發展。
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