人猴交叉活性俱佳！這款CD3納米抗體強效加速TCE藥物臨床轉化進程

在腫瘤與自免免疫治療領域，T細胞銜接器（TCE）是近年來最受關注的“精準免疫調控利器”之一, 它能像 “橋梁”一樣，一端結合疾病相關細胞表面抗原，另一端連接T細胞表面的CD3分子，實現活化T細胞對靶細胞的精準殺傷。而CD3抗體，正是這座 “橋梁” 中決定T細胞激活效率、安全性與臨床轉化潛力的核心部件。

作為核心元件的CD3抗體也是TCE類藥物研發路上的痛點：許多CD3抗體僅能識別人源CD3亞基，而不與猴源CD3結合，導致無法在非人靈長類動物（如食蟹猴）模型中開展更加充分的安全性和有效性驗證，為未來的臨床開發帶來許多不確定性風險；部分抗體雖有交叉活性，卻存在T細胞過度激活、成藥性差，構建成TCE多抗以后輕鏈錯配等問題，也會影響產品的競爭力。

菲鵬制藥團隊最新篩選獲得的高人猴交叉反應活性的CD3納米抗體——具備良好的功能活性和成藥性，并且非常便于進行多抗設計篩選，為TCE或相關產品研發提供了更好的解決方案。

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人猴交叉反應屬性：TCE 安全性評估的核心要素

評價 CD3 納米抗體的臨床轉化價值，“人猴交叉活性” 是一道關鍵門檻——具有能同時識別人和食蟹猴的CD3抗體，可以在食蟹猴模型中開展臨床前安全性評估，而對于B細胞異常相關的疾病，則可以進一步在猴子體內同步進行藥物的有效性驗證，這些數據將為后續人體臨床試驗的研發及商業化決策提供極大的參考價值。菲鵬制藥研究人員通過流式細胞術檢測了內部研發的這款 CD3 納米抗體（FAPON VHH）與人外周血單個核細胞（Hu-PBMCs）、食蟹猴外周血單個核細胞（Cyno-PBMCs）、人的T細胞以及Jurkat細胞系的結合能力。結果顯示：與經典的人猴種屬交叉抗體克隆SP34相似，FAPON VHH和這些細胞均有結合活性，并展示出良好的人猴交叉反應活性。

圖1. CD3抗體與不同細胞的結合活性

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交聯/靶向介導T細胞激活屬性：TCE安全性的關鍵支撐

T細胞激活功能也是衡量一個CD3抗體的重要指標。通過兩種不同的體外T細胞激活實驗驗證了FAPON VHH活化T細胞的功能。結果顯示，當FAPON VHH包被到96孔板時，可以達到與SP34相當的活化水平，而當FAPON VHH不包板時則不會對T細胞產生活化作用。此外，用FAPON VHH構建的TCE雙抗在僅有T細胞的情況下同樣也不會激活T細胞。FAPON VHH 介導 T 細胞活化的過程具有明確依賴性 —— 需借助交聯作用或靶向結合方可完成，這一特性對保障 TCE 藥物的安全性具有顯著積極意義。

圖2. CD3抗體對T細胞的激活作用

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非特異性結合低：TCE安全性與PK的額外保障

抗體的反應特異性是發揮藥效和保證安全性的關鍵因素。對于CD3抗體也是同樣的問題。通過對Raji細胞的非特異性結合檢測和蛋白表面電荷結構模擬分析，結果顯示對照的CD3 VHH PC與Raji細胞有顯著的非特異性結合，此外其抗體存在局部正電荷富集區域，而FAPON VHH則幾乎不與Raji細胞結合，且電荷的分布也更均勻。FAPON VHH 的高反應特異性優勢顯著，這一特性在未來 TCE 藥物的設計與構建過程中，將對提升藥物安全性、優化藥代動力學表現產生至關重要的正向影響。

圖3. CD3抗體的多反應性（Polyreactivity）檢測分析

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TCE應用案例：安全性和有效性的雙重達標

一款優秀的CD3抗體，不僅要“能打”，還要“好用”——也就是能順利融入TCE 雙抗、三抗的構建中，同時具備良好的安全性，有效性以及成藥性等。為了覆蓋更多B細胞，達到更好的B細胞清除效果，研發人員將FAPON VHH與抗CD19以及抗BCMA的納米抗體融合，構建了一系列的TCE雙抗和三抗分子，并對其有效性和安全性進行了系統性的評估。

其中，由CD3-CD19-BCMA三納米抗體組成的 F9， 充分發揮出了CD19/BCMA雙靶點有更大范圍覆蓋的優勢，在CD19與BCMA不同表達模式的腫瘤細胞模型中均表現出強效的殺傷活性，其效能與已經獲批上市的CD19雙抗 Blinatumomab和 BCMA雙抗Elranatamab以及Teclistamab相當甚至更強。此外，其細胞因子分泌水平與已上市雙抗相近，未出現明顯的細胞因子風暴風險。上述研究結果證實，基于 FAPON VHH 構建的 TCE 三抗在體外活性實驗中兼具優異的殺傷活性與良好的安全性。

圖4. TCE分子的殺傷和細胞因子分泌

為進一步驗證體內藥效，研究人員在人外周血單個核細胞（PBMC）重建的免疫缺陷小鼠中開展對比實驗。在Naml-6 和 NCI-H929不同表達模式的原位荷瘤腫瘤模型上，F9均能夠在較低的濃度下展現出非常顯著的抑瘤效果。上述結果證實，基于 FAPON VHH 構建的 TCE 三抗在兩種小鼠荷瘤模型中均有良好的體內有效性。

圖5. TCE分子的體內藥效

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TCE應用案例：結構多元與成藥性出色的雙重兼具

相較于常規抗體，納米抗體在設計成多抗時具有顯著優勢 —— 可徹底規避輕重鏈錯配問題，為多樣化結構設計提供充足空間。在研發實踐中，菲鵬制藥在不同項目里積極探索，通過整合共刺激元件、各類 TAA 抗體等，開展了豐富的結構設計工作，涉及的結構類型多達 百余種。對這些分子的成藥性初步評估結果顯示，絕大部分分子不僅表達水平理想，且純度表現優異。這充分證明，FAPON VHH 在與不同元件組合進行多元結構設計時，既能保障結構設計的靈活性，又能滿足良好的成藥性標準。以下僅列出部分結構作為示例。

圖6. 不同結構TCE分子在早研瞬轉水平下的的成藥性數據示例

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FAPON VHH 較同類 CD3 納米抗體，人猴交叉與殺傷活性 “雙優”

高性能 CD3 納米抗體具有較大的市場需求，隨著技術研發的深入推進，近年來不斷有新的 CD3 納米抗體開發成果被公開報道。本研究選取專利已披露的 4 款 CD3 納米抗體作為對照，與 FAPON這款 CD3 納米抗體進行人猴交叉結合活性橫向比較。實驗結果顯示：在與人 PBMC 及猴 PBMC 的結合反應中，FAPON VHH 的結合活性顯著高于另外 4 款 CD3 納米抗體，特別是在猴交叉反應活性上，表現出遠超其他分子的優勢。此外，當所有 CD3 納米抗體均與相同的抗 TAA 抗體組合形成結構相同的 TCE 雙抗后，FAPON VHH 構建的 TCE 雙抗在殺傷活性上依舊顯著優于由其他 CD3 分子構建的 TCE 雙抗。

圖7. 不同CD3納米抗體的活性比較

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不同親和力CD3抗體改造，滿足多樣需求

在藥物開發領域，CD3 抗體的應用正朝著多元化方向快速拓展，涵蓋體內雙特異性 T 細胞銜接器（TCE）、體內嵌合抗原受體 T 細胞（in vivo CAR-T）、T 細胞受體工程化 T 細胞（TCR-T）以及其他各類 T 細胞靶向治療等研究方向。值得注意的是，不同應用場景對 CD3 抗體的親和力需求存在顯著差異。基于此，本研究以人源化親本分子為基礎，開展了一系列 CD3 抗體親和力定向改造工作。結果顯示：經過親和力改造后，獲得了不同親和力的CD3抗體，大部分抗體在改造過程中仍保有猴交叉結合活性。這些不同親和力的CD3納米抗體序列，為未來探索提供了更多可能性。

圖8. CD3納米抗體的親和力改造

總結與展望：開放合作，共推TCE研發加速

從 “人猴交叉結合” 的核心優勢，到 “激活 T 細胞” 的功能保障，再到 “適配多抗” 所體現的體外活性與成藥潛力，加之 “體內抑瘤 + 安全” 的雙重驗證，這款 CD3 納米抗體為 TCE 研發提供了 “少走彎路” 的優質選擇 —— 它不僅能攻克臨床前動物模型驗證的痛點，更可憑借優異的成藥性與安全性，降低后續研發風險。

菲鵬制藥依托自主研發的納米抗體序列庫，成功搭建起具有特色的 T 細胞銜接器（TCE）技術平臺。該序列庫覆蓋 T 細胞激活的第一信號、第二信號及偏向性激活相關靶點，其配套的納米抗體元件不僅具備良好的人 - 猴交叉反應活性，還可靈活適配多樣化的分子結構設計需求。與此同時，菲鵬制藥同步推進多條優質創新管線的內部開發，研究領域覆蓋腫瘤與自身免疫性疾病兩大方向。在加速自有管線臨床轉化進程的基礎上，公司亦積極開展對外授權合作，以開放共享的模式賦能生物醫藥行業的協同創新與高質量發展。

關于菲鵬制藥

菲鵬制藥是一家專注于生物大分子藥物研發的創新型企業，公司聚焦腫瘤及自身免疫性疾病等重大疾病領域，專注于未被滿足的臨床需求，打造了基于全球領先的哺乳動物細胞展示技術的生物大分子發現平臺、IL-10M蛋白改造和融合平臺、以及基于人猴種屬交叉CD3納米抗體的TCE產品平臺等，并成功開發出多條國際領先的差異化新藥管線。菲鵬制藥已構建涵蓋藥物發現、臨床前研究、CMC、注冊、早期臨床開發等環節的新藥研發能力，始終秉持高效創新理念，致力于開發創新藥物解決方案和提高藥物質量，讓人們用上更好的藥。

若您希望進一步了解菲鵬制藥CD3納米抗體項目及合作信息，歡迎通過以下方式與菲鵬制藥聯系！

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