Phytomed: 成中醫(yī)大及其附屬醫(yī)院等揭示大建中湯中藥成分通過(guò)AMPK/PPARα/CPT1信號(hào)改善非酒精性脂肪肝機(jī)制

【寫(xiě)在前面】：本期推薦的是由成都中醫(yī)藥大學(xué)現(xiàn)代中藥產(chǎn)業(yè)學(xué)院/藥學(xué)院西南中藥資源國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院等研究團(tuán)隊(duì)合作近期發(fā)表于Phytomedicine(IF8.3）的一篇文章，揭示大建中湯中藥成分通過(guò)AMPK/PPARα/CPT1信號(hào)通路改善非酒精性脂肪肝。

【期刊簡(jiǎn)介】

【題目及作者信息】

Constituents-composed Chinese medicine of Dajianzhong Decoction ameliorates Non-alcoholic fatty liver disease via AMPK/PPARα/CPT1 signaling

背景

非酒精性脂肪肝（NAFLD）因其已成為最常見(jiàn)的慢性肝病之一而引起了越來(lái)越多的關(guān)注。大建中湯（DJZ）是一種具有抗NAFLD作用的經(jīng)典中藥方劑；然而，其潛在的組成和分子機(jī)制仍然未知。

方法

為了通過(guò)成分組合中藥策略（cc-CM）探索DJZ抗NAFLD作用的潛在成分和分子機(jī)制，將高脂飲食（HFD）誘導(dǎo)的小鼠和游離脂肪酸（FFA）誘導(dǎo)的AML12細(xì)胞用作NAFLD的動(dòng)物和細(xì)胞模型。中藥成分DJZ（DJZ-cm）是在其成分被血液吸收的基礎(chǔ)上制備的。進(jìn)行RNA序列分析結(jié)合qRT-PCR驗(yàn)證，分析DJZ cm的潛在靶基因。隨后進(jìn)行生物信息學(xué)富集分析，預(yù)測(cè)潛在的分子途徑。最后，進(jìn)行了蛋白質(zhì)印跡、免疫組織化學(xué)、免疫熒光、組織病理學(xué)檢查和生化指標(biāo)測(cè)定，以驗(yàn)證預(yù)測(cè)的分子通路。

結(jié)果

DJZ改善了HFD喂養(yǎng)小鼠的NAFLD癥狀，包括肝脂肪變性、肝功能指數(shù)、口服葡萄糖耐量和胰島素耐量。此外，我們首次根據(jù)這些化合物在血清中的含量比例制備了DJZ cm，包括人參皂苷Rg1（30.5%）、人參皂苷Re（9.52%）、人參皂甙Rb2（10.5%）、參皂苷Rb1（15.1%）、羥基-α-桑椹糖（11.45%）、羥基-β-桑葚糖（5.11%）、香草內(nèi)酯（8.77%）和6-姜酚（9%）。有趣的是，DJZ cm（40 mg/kg）的抗NAFLD作用與DJZ（400 mg/kg）相當(dāng)。RNA測(cè)序結(jié)合qRT-PCR分析表明，AMPK/PPARα/CPT1信號(hào)傳導(dǎo)可能與DJZ cm的抗NAFLD作用有關(guān)。這些結(jié)果進(jìn)一步驗(yàn)證了預(yù)測(cè)結(jié)果，DJZ cm治療通過(guò)促進(jìn)PPARα的核轉(zhuǎn)移和增加AMPK的磷酸化來(lái)上調(diào)CPT1A表達(dá)。最后，我們的結(jié)果表明，DJZ-cm可以通過(guò)多種藥物靶點(diǎn)發(fā)揮抗NAFLD作用，包括TRPV1和AMPK。

結(jié)論

cc-CM的使用是鑒定中藥活性物質(zhì)和機(jī)制的可行方法，DJZ和DJZ-CM通過(guò)調(diào)節(jié)AMPK/PPARα/CPT1信號(hào)傳導(dǎo)和靶向TRPV1和AMPK對(duì)NAFLD具有可靠的治療作用。我們目前的工作將對(duì)DJZ臨床治療NAFLD的進(jìn)一步現(xiàn)代制劑開(kāi)發(fā)具有雙重意義。

圖文摘要

【前言】

非酒精性脂肪肝?。∟AFLD），也稱(chēng)為代謝功能障礙相關(guān)脂肪肝?。∕AFLD）或代謝功能障礙相關(guān)的脂肪變性肝?。∕ASLD），因其已成為臨床上最常見(jiàn)的慢性肝病之一，嚴(yán)重危害人類(lèi)健康而受到越來(lái)越多的關(guān)注。NAFLD是一種與脂質(zhì)代謝功能障礙和胰島素抵抗相關(guān)的復(fù)雜多系統(tǒng)疾病，可大致分為非酒精性脂肪肝（NAFL）及其晚期非酒精性脂肪性肝炎（NASH）。此外，NAFLD是肝纖維化、肝硬化甚至肝細(xì)胞癌發(fā)展的重要致病因素。重要的是，非酒精性脂肪肝目前影響著全球高達(dá)38%的成年人口的健康；然而，不幸的是，臨床上缺乏可用于治療這種疾病的特定藥物。迄今為止，只有兩種臨床藥物（Rezafra和Semagutide）獲得了美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局的批準(zhǔn)；然而，上述兩種藥物的價(jià)格非常高，大多數(shù)家庭負(fù)擔(dān)不起。因此，尋找更新穎、可靠和安全的替代療法來(lái)改善NAFLD已成為當(dāng)務(wù)之急。

中藥及其配方無(wú)疑有利于治療各種代謝性疾病，如NAFLD、糖尿病和肥胖癥，并可作為這些疾病的替代療法。此外，還有人認(rèn)為，與合成藥物相比，包括中藥在內(nèi)的天然藥物往往表現(xiàn)出更高的安全性。此外，毫無(wú)疑問(wèn)，與合成藥物相比，中藥的價(jià)格通常較低。因此，包括中藥在內(nèi)的天然藥物是尋找有效、安全、價(jià)格低廉的候選藥物的理想資源。大建中湯DJZ，是一種經(jīng)典的中藥方劑，起源于漢代的《金匱要略》。DJZ具有“溫補(bǔ)虛、理氣止痛”的作用，可用于治療胃痛、腸易激綜合征、術(shù)后腸梗阻等。此外，據(jù)報(bào)道，DJZ可用于治療功能性消化不良、結(jié)腸炎和認(rèn)知衰老。然而，到目前為止，DJZ的潛在成分和潛在的分子機(jī)制仍然未知。組分中藥（cc-CM）是一種從整體角度探索中藥方劑潛在活性成分和藥理機(jī)制的新概念和策略，這將是提高中藥方劑生物活性、質(zhì)量穩(wěn)定性和安全性的可行途徑。因此，在本研究中，我們首次在其成分被吸收到血液中的基礎(chǔ)上制備了中藥復(fù)方DJZ（DJZ-cm），并進(jìn)一步探討了其抗NAFLD的作用和潛在機(jī)制，這將為DJZ臨床治療NAFLD的進(jìn)一步現(xiàn)代制劑開(kāi)發(fā)提供雙方面的參考。

【結(jié)果部分】

1.高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖小鼠肝臟中 DJZ 對(duì)脂質(zhì)代謝的影響。

2.DJZ 對(duì)AML-12細(xì)胞中FFA誘導(dǎo)脂質(zhì)積累的影響。

3.大建中湯（DJZ -cm）中藥配方的成分制備。

4.DJZ 或 DJZ -cm對(duì) HFD 小鼠肥胖和胰島素敏感性的影響。

5.DJZ 或 DJZ -cm對(duì)小鼠血清、組織及AML12細(xì)胞脂質(zhì)代謝的影響。

6.RNA序列分析和富集分析。

7.DJZ 或 DJZ -cm對(duì)糖尿病（Diabetes Mellitus，HFD）小鼠肝臟組織中 AMPK / PPARα /CPT1信號(hào)通路的影響。

8.DJZ 或 DJZ -cm對(duì)FFA誘導(dǎo)的AML-12細(xì)胞中 AMPK / PPARα /CPT1信號(hào)通路的影響。

9.AMPK 抑制劑多索莫芬（化合物C）通過(guò)抑制 AMPK / PPARα /CPT1信號(hào)通路，對(duì) DJZ -cm的抗 NAFLD 作用產(chǎn)生影響。

10.TRPV1抑制劑SB-366791通過(guò) PPARα /CPT1A信號(hào)通路對(duì) DJZ -cm抗 NAFLD 作用的影響。

11.HAS與姜酮分別結(jié)合TRPV1和 AMPK ，從而調(diào)控脂質(zhì)代謝。

12.非酒精性脂肪肝采用 DJZ -cm療法的作用機(jī)制。

【結(jié)論與討論】

綜上所述，本研究結(jié)果表明，成分組合中藥（cc-CM）策略是識(shí)別中藥活性成分及分子作用機(jī)制的有效方法，同時(shí)為中藥現(xiàn)代化制藥提供了可行路徑。此外， DJZ 或 DJZ -CM通過(guò)靶向TRPV1和 AMPK 調(diào)控 AMPK / PPARα /CPT1信號(hào)通路，對(duì) NAFLD 展現(xiàn)出可靠的治療效果，可作為治療該疾病的替代療法（圖12）。

注：本文原創(chuàng)表明為原創(chuàng)編譯，非聲張版權(quán)，侵刪！

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