藥物篩選的效率密碼
——TR-FRET技術
時間分辨熒光共振能量轉移(TR-FRET)技術是一種先進的均相檢測方法,廣泛應用于藥物發現、信號通路研究和蛋白質功能分析領域。該技術巧妙地結合了時間分辨熒光(TRF)與熒光共振能量轉移(FRET)兩種原理的優勢:通過使用鑭系元素(如Eu、Tb)作為長壽命供體熒光,延遲檢測窗口,從而有效消除培養基、化合物或生物樣品自身熒光帶來的背景干擾,大幅提升信噪比和檢測靈敏度。TR-FRET將復雜的檢測方法開發過程簡化為“稀釋-混合-孵育-檢測”的簡易流程,支持在微孔板中直接進行均相檢測,無需洗滌,極大地提高了實驗效率、結果的可靠性與重復性,是實現高通量藥物篩選的強大工具。
藥物篩選的“黃金跳板”:
為什么高段位研發都在用TR-FRET替代傳統ELISA?
早期藥物篩選,從 hits(苗頭化合物) 邁向 leads(先導化合物) 的進階過程,是一次“速度”和“精準度”的多維競技。盡管ELISA作為傳統“金標準”被廣泛使用,但TR-FRET技術已在多維度實現跨越式升級,為早期藥物篩選提供更高效、更可靠的解決方案。
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本期特別推薦:TR-FRET Toolbox
Q
什么是Toolbox?
TR-FRET Toolbox是一套基于TR-FRET技術的通用工具,旨在幫助研究人員根據具體實驗需求,進行自由選擇和組合,快速構建個性化 的TR-FRET檢測體系。
ACROBiosystems百普賽斯基于成熟的TR-FRET技術平臺自主開發了一系列通用型工具產品,包含:
經Eu或FA標記的蛋白(Streptavidin、Protein A等):適用于多種檢測體系搭建;
經Eu或FA標記的抗標簽抗體(anti-His、anti-Fc、anti-Flag等):適配標簽融合蛋白,項目兼容性更廣;
經Eu或FA標記的二抗(anti-human IgG / anti-mouse IgG等):識別Fc區域,可用于抗體及Fc標簽蛋白的檢測需求;
TR-FRET體系搭建專用反應緩沖液:經系統驗證及優化,完美適配TR-FRET體系需求。
產品列表
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使用Toolbox搭建的TR-FRET體系示意圖
應用驗證數據
結合體系驗證1
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Details of the assay components are provided in the table above. Biotinylated Human CD3E&CD3D Heterodimer Protein, His,Avitag&Tag Free (Cat. No. CDD-H82W6), at 20 ng/well, can bind to the Monoclonal Anti-Human CD3 Antibody, Mouse IgG2a (Clone: OKT3), premium grade (Cat. No. CDE-M120a) with a linear detection range of 8-0.03125 μg/mL.
結合體系驗證2
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Details of the assay components are provided in the table above. Biotinylated Human PD-1 Protein, Avitag,His Tag (Cat. No. PD1-H82E4), at 16 ng/well, can bind to the Monoclonal Anti-Human PD-1 Antibody, Human IgG4 with a linear detection range of 10-0.0195 μg/mL.
結合體系驗證3
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Details of the assay components are provided in the table above. Biotinylated Human CD3E&CD3D Heterodimer Protein, His,Avitag&Tag Free (Cat. No. CDD-H82W6), at 50 ng/well, can bind to the Monoclonal Anti-Human CD3 Antibody, Mouse IgG2a (Clone: OKT3), premium grade (Cat. No. CDE-M120a) with a linear detection range of 5-0.01 μg/mL.
抑制體系驗證1
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Details of the assay components are provided in the table above. An inhibition Assay was performed to evaluate the interaction between Biotinylated Human PD-1, Fc, Avi tag (Cat. No. PD1-H82F1) and Human PD-L1, His Tag (Cat. No. PD1-H5229) using Monoclonal Anti-Human PD-1 Antibody, Human IgG4 resulting in a typical IC50 of 1.774 μg/mL.
抑制體系驗證2
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Details of the assay components are provided in the table above. An inhibition Assay was performed to evaluate the interaction between Biotinylated Human PD-1, Fc, Avi tag (Cat. No. PD1-H82F1) and Human PD-L1, His Tag (Cat. No. PD1-H5229) using Monoclonal Anti-Human PD-1 Antibody, Human IgG4 resulting in a typical IC50 of 9.13 μg/mL.
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